PRSV运动相关病毒蛋白的Sos恢复系统诱饵载体构建及白激活效应检测

为研究与番木瓜环斑病毒运动相关的病毒蛋白（CP、HC-Pro、CI）互作的寄主因子，构建以Sos恢复系统为原理的胞质酵母双杂交系统的3个病毒蛋白诱饵载体，并检测其自激活作用来验证是否适用于后续的文库筛选。通过RT-PCR从番木瓜环斑病毒海南分离物中扩增出这3个病毒蛋白的片段，按正确方向将目标片段分别插入诱饵载体pSos中，并将重组质粒导入酵母温度敏感酵母菌株cdc25H，检测其表达产物对酵母Sos恢复系统Ras信号通路的激活作用而产生的细胞温敏特性影响。结果表明，这3个含番木瓜环斑病毒运动相关的病毒蛋白的诱饵载体构建正确，对酵母菌株cdc25H的Sos恢复系统无激活作用，激活试验为阴性。