| 系列功能区缺失的猪内源反转录病毒5′非编码区的构建及序列分析 |
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| 引用本文： | 丁芳,吕茂民,马玉媛,吴健敏,田克恭,毕丁仁,章金刚.系列功能区缺失的猪内源反转录病毒5′非编码区的构建及序列分析[J].中国兽医学报,2007(4). |
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| 作者姓名： | 丁芳 吕茂民 马玉媛 吴健敏 田克恭 毕丁仁 章金刚 |
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| 作者单位： | 华中农业大学动物医学院，军事医学科学院野战输血研究所，军事医学科学院野战输血研究所，军事医学科学院野战输血研究所，农业部兽医诊断中心，华中农业大学动物医学院，华中农业大学动物医学院 湖北武汉430070，军事医学科学院野战输血研究所，北京100850，北京100850，北京100850，北京100850，北京100094，湖北武汉430070，湖北武汉430070，军事医学科学院野战输血研究所，北京100850 |
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| 基金项目： | 北京市自然科学基金资助项目(5053028)，中国博士后科学基金资助项目(2003033195)，国家自然科学基金资助项目(30270989) |
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| 摘 要： | 为构建缺失不同功能区的猪内源性反转录病毒(PERV)5′非编码区(5′UTR)克隆,分析5′UTR的转录调控规律,以质粒WZSP-293-5′UTR为模板,应用重组PCR方法分别扩增5′UTR与缺失引物结合区及前导序列(PBS-Leader),即5′UTR(5′长末端重复区)、U3区、R区、U3区中重复序列的5′UTR等5种PCR片段,并分别将其克隆至T载体上,挑取阳性克隆,酶切鉴定插入方向,选择正确方向插入的克隆,测序并进行序列分析。结果表明,构建了系列功能区缺失的5种5′UTR克隆,分别命名为UTR-PMD、LTR-PMD、UTR-U3-PMD、UTR-R-PMD、UTR-U-PMD以备后用。结论:在PERV 5′UTR的不同功能区中含有一系列可能的转录因子结合位点;中国五指山猪内源性反转录病毒(WZSP-PERV)在293细胞中传代时,不仅U3重复区数目增加,重复亚型也发生了一定的改变。
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| 关 键 词： | 中国五指山猪 猪内源性反转录病毒 5′UTR 缺失 克隆 |
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