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杂志ISSN号
一种基于Xcm Ⅰ酶切的pUC19-T载体的构建(摘要)
作者姓名:
孙程龙
李业伟
王颖
宫婷
扈荣良
作者单位:
吉林大学畜牧兽医学院;军事医学科学院军事兽医研究所;吉林农业大学畜牧兽医学院
摘 要:
[目的]构建以pUC19质粒为基础可利用XcmⅠ内切酶制备的T载体。[方法]化学合成2条含有双XcmI酶切位点的互补寡聚核苷酸链,经过变性、复性后克隆入pUC19质粒的HindⅢ和BamHⅠ位点之间,通过XcmI酶切后得到一个线性化的带有3末端突出一个T碱基的T载体。[结果]经TA克隆验证,制备的pUC19-HB-T载体对PCR产物的克隆率达到95%以上。[结论]所构建的pUC19-HB-T载体可用于PCR产物的克隆、测序及后续分子生物学操作。
关 键 词:
T载体
XcmⅠ限制性内切酶
TA克隆
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