茶儿茶素合成关键酶基因CsANS和CsLAR的功能鉴定 |
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作者姓名: | 张芷苓 张媛媛 林晓蓉 李斌 陈忠正 |
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作者单位: | 1. 华南农业大学食品学院;2. 华南农业大学,广东省功能食品活性物重点实验室 |
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基金项目: | 广东省科技厅公益研究与能力建设项目(2015A030302065); |
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摘 要: | 以‘英红9号’茶树[Camelliasinensis(L.)O.Kuntze]为材料,克隆了儿茶素合成途径的两个关键酶基因CsANS和CsLAR,并利用原核表达、亚细胞定位以及转基因表达分析对其功能进行鉴定。结果表明,CsANS和CsLAR开放阅读框(openreadingframe,ORF)分别长1068和1029bp,与TPIA数据库中来源于‘舒茶早’的对应基因同源性均高达99%。CsANS和CsLAR可溶性蛋白均能在原核表达系统诱导获得,并经GST标签成功纯化。本氏烟草叶片的瞬时表达结果显示,CsANS和CsLAR编码的蛋白定位于细胞质和细胞核。利用农杆菌介导的遗传转化方法在茶愈伤组织中超表达CsANS和CsLAR,结果显示其均能显著促进总儿茶素的合成,其中CsANS主要促进顺式儿茶素(EC和EGCG)含量的增加,而CsLAR主要促进反式儿茶素(C、GC、CG和GCG)的积累。推测在‘英红9号’茶树中CsANS的功能主要是促进顺式儿茶素的合成,而CsLAR更利于反式儿茶素的合成。
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关 键 词: | 茶树 儿茶素 ANS LAR 过表达 |
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