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温郁金RAPD-PCR反应体系建立及条件优化
引用本文:王晓慧,汤晓闯,杨恩秀,姜程曦,李敏,李校堃.温郁金RAPD-PCR反应体系建立及条件优化[J].北方园艺,2008(4):226-229.
作者姓名:王晓慧  汤晓闯  杨恩秀  姜程曦  李敏  李校堃
作者单位:1. 吉林农业大学,生物反应器与药物开发教育部工程研究中心,吉林,长春,130118
2. 温州医学院药学院,浙江,温州,325035
3. 吉林农业大学,生物反应器与药物开发教育部工程研究中心,吉林,长春,130118;温州医学院药学院,浙江,温州,325035
基金项目:浙江省科研项目,瑞安市重大科技资助项目,温州市科技计划
摘    要:在提取纯化温郁金DNA的基础上,利用PCR扩增技术,对Mg2 、dNTP、模板DTA、引物、Taq聚合酶等反应条件进行优化,建立温郁金基因组DNA的RAPD-PCR最佳反应体系.结果表明:最佳条件是总体积为25μL,其中Mg2 (25mM)2μL,Taq 聚合酶(5 U/μL)0.3μL,引物浓度(20μM)1.0μL,模板DNA(5 ng/μL)1.0μL,dNTP(2.5 mM)2.0μL,10×PCRbuffer 2.5μL;PCR扩增程序为94℃预变性5min;94℃变性35 s,36℃退火1min,72℃复性1.5 min,共42个循环;最后72℃延伸10 min,该研究得出的体系是温郁金RAPD-PCR的最适宜反应体系,具有省时、经济、简便以及扩增条带较清晰、稳定等特点,为今后温郁金的遗传多样性研究奠定了基础.

关 键 词:温郁金  基因组DNA  RAPD-PCR反应体系
文章编号:1001-0009(2008)04-0226-04
修稿时间:2008年1月17日

Optimization of RAPD Reaction systems for Curcuma wenyujin
WANG Xiao-hui,TANG Xiao-chuang,YANG En-xiu,JIANG Cheng-xi,LI Min,LI Xiao-kun.Optimization of RAPD Reaction systems for Curcuma wenyujin[J].Northern Horticulture,2008(4):226-229.
Authors:WANG Xiao-hui  TANG Xiao-chuang  YANG En-xiu  JIANG Cheng-xi  LI Min  LI Xiao-kun
Abstract:
Keywords:Curcuma wenyujin  Genomic DNA  RAPD-PCR amplication system
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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