马泰勒虫RON2基因的原核表达及生物信息学分析

【目的】对马泰勒虫棒状体颈部蛋白2（RON2）进行原核表达和生物信息学分析，为后续蛋白互作试验提供材料基础。【方法】以马泰勒虫新疆分离株为研究对象，克隆其RON2基因，并与GenBank中已知的马泰勒虫美国WA株基因组数据和顶复门原虫RON2基因序列本地数据库进行BLAST比对，确定其进化关系。构建重组表达载体pET-32a-RON2，融合表达重组蛋白，对RON2基因编码蛋白进行生物信息学分析。【结果】马泰勒虫新疆株RON2基因（NCBI登录号MT939257）长3 920 bp，高度保守，与顶复门原虫RON2基因核苷酸和氨基酸序列的相似性分别为31.2%～82.7%和23.8%～79.5%。成功构建原核表达重组质粒，获得的RON2融合重组蛋白分子质量为26 ku，为包涵体蛋白。生物信息学分析表明，RON2蛋白是一种碱性、不稳定亲水性跨膜蛋白，二级结构以α螺旋为主，亲水性较差，抗原性较弱，与其他顶复门原虫RON2蛋白具有相似的三级空间特殊结构和氨基酸序列，且可能与其他入侵蛋白存在相互作用关系。【结论】获得马泰勒虫新疆株RON2基因，诱导表达获得部分RON2融合重组蛋白，该蛋白存在与其他入侵相关蛋白相互作用的位点，可能参与了虫体入侵宿主细胞的过程。

Prokaryotic expression and bioinformatics analysis of RON2 gene in Theileria equi