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定量表达和整体原位杂交研究Doublesex基因在不同生殖状态蚤状溞的表达
引用本文:周 伟,陈 萍,邱成功,周健凯,郭晓鸽,王丹丽,赵云龙.定量表达和整体原位杂交研究Doublesex基因在不同生殖状态蚤状溞的表达[J].水产学报,2013,37(11):1655-1662.
作者姓名:周 伟  陈 萍  邱成功  周健凯  郭晓鸽  王丹丽  赵云龙
作者单位:宁波大学海洋学院;宁波大学海洋学院;宁波大学海洋学院;宁波大学海洋学院;宁波大学海洋学院;宁波大学海洋学院;华东师范大学生命科学学院
基金项目:国家自然科学基金项目(31172043);浙江省自然科学基金项目(LY12C19003);上海市科技创新行动计划项目(12391900700);公益性行业(农业)科研专项(200903056);宁波市科技局重大择优项目(2012C10020)
摘    要:为研究doublesex(dsx)基因在不同生殖状态的蚤状溞的时空表达状况,提取不同生殖状态的蚤状溞RNA,采用RT-PCR和Quantitative real-time PCR检测了dsx在不同生殖状态溞体的表达差异,并通过体外转录制备DIG标记的Doublesex的RNA探针;采用整体原位杂交方法研究dsx基因在不同生殖状态的蚤状溞的时空表达状况。结果显示,RT-PCR检测发现dsx在雌雄溞体没有性别特异性的选择性拼接,只有一种相同的转录产物。Real-time PCR显示,dsx在雄溞中表达水平最高,是孤雌溞的2.6倍,两性雌溞的4.9倍,三者之间有显著性差异,表现出性别差异性表达。整体原位杂交发现,在所取样的不同生殖状态溞体中dsx基因也均有表达,但其部位与表达量不同,且在雌雄溞体中表现出性别差异。在雄溞的第一触角和第一胸肢显现得尤为明显,且在复眼中也有表达。孤雌溞和两性雌溞对应部位表达则相对较弱。结果表明,dsx基因很有可能在调控蚤状溞生殖转换和性别分化上起到很大作用。

关 键 词:蚤状溞    doublesex基因    RNA探针    整体原位杂交
收稿时间:2013/7/24 0:00:00
修稿时间:2013/9/19 0:00:00

Doublesex gene expression of Daphnia pulex during different modes of reproduction by using whole mount in situ hybridization and quantitative expression
ZHOU Wei,CHEN Ping,QIU Chenggong,ZHOU Jiankai,GUO Xiaoge,WANG Danli and ZHAO Yunlong.Doublesex gene expression of Daphnia pulex during different modes of reproduction by using whole mount in situ hybridization and quantitative expression[J].Journal of Fisheries of China,2013,37(11):1655-1662.
Authors:ZHOU Wei  CHEN Ping  QIU Chenggong  ZHOU Jiankai  GUO Xiaoge  WANG Danli and ZHAO Yunlong
Abstract:
Keywords:Daphnia pulex  doublesex(dsx)  RNA antisense probe  whole mount in situ hybridization
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