细菌λ Red重组技术的应用及其影响因素 |
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作者姓名: | 付喜爱 张德显 周维 于立辉 田春莲 刘明春 |
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作者单位: | 沈阳农业大学畜牧兽医学院,辽宁沈阳,110866 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(31272601);国家自然科学基金项目 |
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摘 要: | 由λ噬菌体的exo、beta、gam 3个基因分别编码的Exo、Beta和Gam蛋白组成λRed同源重组系统。λRed重组是细菌靶基因置换的有效技术,该技术发展迅速,已广泛应用于大肠埃希菌等细菌染色体DNA的基因敲除、基因整合,可以对任何大小的DNA分子进行精确修饰。利用λRed重组系统不仅可以构建工程菌,还可以为研究细菌的致病机理和耐药机制提供新的方法。然而,许多应用因重组频率而受到限制,影响重组频率的因素主要有底物浓度、同源片段的长度、内源性核酸酶、错配蛋白等。论文综述了λRed同源重组技术的应用进展及影响重组的因素,以期为优化重组试验方案及提高试验的成功率提供帮助。
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关 键 词: | λ Red同源重组 应用 底物 内源性核酸酶 错配蛋白 |
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