| 禽流感病毒 H3N2亚型三重 RT-PCR 检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 刘婷婷,谢芝勋,宋德贵,罗思思,谢丽基,李孟,谢志勤,邓显文. 禽流感病毒 H3N2亚型三重 RT-PCR 检测方法的建立[J]. 动物医学进展, 2015, 0(2) |
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| 作者姓名： | 刘婷婷 谢芝勋 宋德贵 罗思思 谢丽基 李孟 谢志勤 邓显文 |
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| 作者单位： | 1. 广西师范大学生命科学学院,广西桂林,541000
2. 广西兽医研究所畜禽疫苗新技术重点实验室,广西南宁,530001 |
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| 基金项目： | 广西特聘专家专项项目(2011B020)；广西科技攻关重大专项项目(1222003-2-4)；广西畜禽疫苗新技术重点实验室项目 |
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| 摘 要： | 为建立检测禽流感病毒（AIV ）且同时区分 H3N2亚型AIV 的方法，本研究根据 H3、N2亚型AIV HA、NA基因及AIV最保守M 基因的保守区域，设计并筛选出3对特异性引物，通过优化反应条件，建立了AIV H3N2亚型和M 基因三重RT‐PCR的检测方法。对该法进行特异性及敏感性检测，并通过该三重RT‐PCR方法对96份临床样品进行检测。结果显示，H3N2亚型AIV可扩增出3条特异性条带，其中518 bp为AIV M 基因、418 bp为N2亚型AIV NA基因、271 bp为H3亚型AIV HA基因；H3亚型和N2亚型AIV均可扩增出2条特异性条带，大小分别为518 bp、271 bp和518 bp、418 bp；其他亚型AIV可扩增出一条特异性条带，大小为518 bp；常见禽病病原体均未扩增出任何条带。敏感性试验表明该法对 H3N2亚型AIV的检测下限为100 pg ；96份临床样品检测结果与病毒分离鉴定结果一致。本研究所建立的AIV H3N2亚型和M 基因三重RT‐PCR为一种简便、快速、有效的检测方法。
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| 关 键 词： | 禽流感病毒 H3N2亚型 M 基因 三重RT-PCR |
Simultaneous Detection of H3N2 Subtypes and M Gene of Avian Influenza Virus by Multiplex PCR |
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| LIU Ting-ting,XIE Zhi-xun,SONG De-gui,LUO Si-si,XIE Li-ji,LI Meng,XIE Zhi-qing,DENG Xian-weng. Simultaneous Detection of H3N2 Subtypes and M Gene of Avian Influenza Virus by Multiplex PCR[J]. Progress In Veterinary Medicine, 2015, 0(2) |
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| Authors: | LIU Ting-ting XIE Zhi-xun SONG De-gui LUO Si-si XIE Li-ji LI Meng XIE Zhi-qing DENG Xian-weng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Avian influenza virus H3N2 subtype AIV M gene multiplex PCR |
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