紫花苜蓿MsWRKY33转录因子的分离及遗传转化研究 |
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引用本文: | 冯光燕,王学敏,付媛媛,方志红,高洪文,张新全.紫花苜蓿MsWRKY33转录因子的分离及遗传转化研究[J].草业学报,2015,24(11):48-57. |
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作者姓名: | 冯光燕 王学敏 付媛媛 方志红 高洪文 张新全 |
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作者单位: | 1.四川农业大学草业科学系,四川 温江 611130; 2.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100193 |
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基金项目: | 现代农业产业技术体系牧草产业体系,国家自然科学基金,中国农业科学院科技创新工程 |
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摘 要: | WRKY转录因子是植物特有的转录因子,广泛参与植物对多种逆境胁迫的反应。但是对紫花苜蓿中WRKY转录因子的研究还较少。本研究从紫花苜蓿中克隆了一个WRKY I类转录因子MsWRKY33。该基因CDS全长1536 bp,编码512个氨基酸,结构分析显示MsWRKY33包括两个WRKY结构域和一个C2H2锌指结构(C-X4-C-X23-H-X-H),表明其属于WRKY I 族WRKY转录因子。亚细胞定位预测MsWRKY33蛋白定位在细胞核。MsWRKY33基因受盐、干旱和冷胁迫诱导,暗示基因可能参与了这些逆境胁迫的调控。构建原核表达载体pET-MsWRKY33, SDS-PAGE分析表明在大肠杆菌中表达了MsWRKY33蛋白。扩增MsWRKY33编码区cDNA,以pBI121为基础载体,构建植物超表达载体pBI121-MsWRKY33。采用农杆菌介导的愈伤组织培养法转化紫花苜蓿。利用nptⅡ基因引物和载体特异引物检测抗性苗呈阳性,表明目的基因已成功导入紫花苜蓿基因组中。qRT-PCR检测发现,MsWRKY33基因在转基因株系中得到增强表达。本研究为进一步探索WRKY转录因子基因在紫花苜蓿抗逆性调控中的作用奠定了基础。
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关 键 词: | 紫花苜蓿 MsWRKY33 转录因子 遗传转化 |
收稿时间: | 2015-03-10 |
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