Cry1Ia蛋白的表达与纯化 |
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引用本文: | 郭小琴,钱红梅,郭星,高佳丽,张义茹,高建华,王兴春. Cry1Ia蛋白的表达与纯化[J]. 山西农业科学, 2019, 0(5) |
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作者姓名: | 郭小琴 钱红梅 郭星 高佳丽 张义茹 高建华 王兴春 |
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作者单位: | 山西农业大学生命科学学院;山西农业大学农业生物工程研究所 |
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摘 要: | 苏云金芽孢杆菌表达的Cry1Ia蛋白对鳞翅目和鞘翅目昆虫具有较好的杀虫活性。为便于后期评价不同的Cry1Ia蛋白,建立了Cry1Ia蛋白的表达与纯化体系。将一个cry1Ia基因的编码基因接入pET28aDel表达载体,并将其转化大肠杆菌BL21(DE3)star菌株。在大肠杆菌中诱导Cry1Ia蛋白的表达,并与Bt中的表达产物进行比较。最后,利用Cry1Ia蛋白C端包含的组氨酸标签,对大肠杆菌表达的Cry1Ia蛋白进行纯化。结果显示,大肠杆菌中Cry1Ia蛋白随着表达时间的延长,产物积累显著,并且其表达量高于Bt菌株,因此,其更适宜生产完整的Cry1Ia蛋白。对大肠杆菌表达的Cry1Ia进行纯化,获得了理想的结果。研究构建了Cry1Ia蛋白的大肠杆菌表达体系,并成功对其进行纯化,可为进一步研究此类蛋白的杀虫活性和机制奠定基础。
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关 键 词: | 苏云金芽孢杆菌 大肠杆菌 cry1Ia 蛋白表达 蛋白纯化 |
Expression and Purification of the Cry1Ia Protein |
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