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| 水稻叶片cDNA-AFLP技术体系的建立和优化 | |
| 引用本文： | 许锦彪,段彪,邵园元,任贺春,杨海林,张鑫,赵华,曹云英,郎有忠.水稻叶片cDNA-AFLP技术体系的建立和优化[J].种子,2012,31(6):35-39. |
| 作者姓名： | 许锦彪 段彪 邵园元 任贺春 杨海林 张鑫 赵华 曹云英 郎有忠 |
| 作者单位： | 1. 南通大学图书馆,江苏南通,226019 2. 南通大学生命科学学院,江苏南通,226019 3. 扬州大学江苏省作物遗传生理重点实验室,江苏扬州,225009 |
| 基金项目： | 江苏省南通市科技局计划项目，江苏省重点实验室开放课题，南通大学校级前期预研项目，南通大学博士启动基金 |
| 摘 要： | 以高温和常温处理的水稻幼苗叶片为材料,对影响cDNA-AFLP分析体系的关键因素进行了分析,建立了适宜水稻的cDNA-AFLP分析体系,并得到了清晰可辨的cDNA-AFLP指纹图谱。结果表明:离心柱式试剂盒提取的RNA较完整,纯度较高;双链逆转录试剂盒形成的cDNA经EcoRⅠ(37℃,2 h)和MseⅠ(65℃,2 h)完全酶切后,4℃连接过夜;20μL的体系中,连接产物稀释10倍液5.0μL作为预扩增的模板,并且预扩增反应的循环数为35,预扩增产物稀释20倍作为选择性扩增的模板,扩增结果较佳;6%PAGE分离快速银染法显示,64对选择性扩增引物中筛选出多态生条带丰富的AFLP引物50对。本研究为利用cDNA-AFLP分析水稻抗高温基因进行深入的研究奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 水稻 cDNA-AFLP 叶片 体系优化 |
Establishment and Optimization of cDNA-AFLP Reaction System for Rice Leaves |
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| XU Jin-biao , DUAN Biao , SHAO Yuan-yuan , REN He-chun , YANG Hai-lin , ZHANG Xin , ZHAO Hua , CAO Yun-ying , LANG You-zhong.Establishment and Optimization of cDNA-AFLP Reaction System for Rice Leaves[J].Seed,2012,31(6):35-39. | |
| Authors: | XU Jin-biao DUAN Biao SHAO Yuan-yuan REN He-chun YANG Hai-lin ZHANG Xin ZHAO Hua CAO Yun-ying LANG You-zhong |
| Institution: | 1.Library,Nantong University,Nantong Jiangsu 226007,China;2.College of Life Sciences,Nantong University,Nantong Jiangsu 226007,China;3.Key Laboratory of Crop Genetics and Physiology of Jiangsu Province,Yangzhou University,Yangzhou Jiangsu 225009,China) |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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