| 猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF3基因的表达及其单克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 刘金霞,周艳君,安同庆,仇华吉,王云峰,童光志. 猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF3基因的表达及其单克隆抗体的制备[J]. 中国兽医学报, 2007, 27(5): 609-612 |
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| 作者姓名： | 刘金霞 周艳君 安同庆 仇华吉 王云峰 童光志 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;国家重点基础研究发展计划(973计划) |
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| 摘 要： | 将猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）CH-1a株的GP3蛋白基因进行截短修饰后,克隆于pGEX6p-1载体中,转化大肠杆菌,并进行诱导表达。经SDS-PAGE检测,融合表达的蛋白rtGP3大小约40 000;Western blotting分析证实,表达的融合蛋白rtGP3能被PRRSV阳性血清所特异性识别。收获融合表达的rtGP3,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,分别以表达的融合蛋白rtGP3和GST蛋白作为包被抗原,通过间接ELISA方法对融合细胞的上清液进行检测,结果获得了5株能稳定分泌抗rtGP3蛋白抗体的杂交瘤细胞株,命名为31A2,31G11,32B12,32D4和32H7。利用PRRSV感染的Marc-145细胞进行间接免疫荧光检测显示,所获得的5株单克隆抗体均能与PRRSV感染细胞产生特异性免疫荧光。亚型鉴定结果表明,5株单克隆抗体均为IgG1型,且轻链均为κ链。
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| 关 键 词： | 猪繁殖与呼吸综合征病毒 单克隆抗体 |
| 文章编号： | 1005-4545（2007）05-0609-04 |
| 修稿时间： | 2005-12-27 |
Prokaryotic expression and development of monoclonal antibody against glycoprotein 3 (GP3) of PRRSV CH-1a strain |
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| LIU Jin-xia,ZHOU Yan-jun,AN Tong-qing,QIU Hua-ji,WANG Yun-feng,TONG Guang-zhi. Prokaryotic expression and development of monoclonal antibody against glycoprotein 3 (GP3) of PRRSV CH-1a strain[J]. Chinese Journal of Veterinary Science, 2007, 27(5): 609-612 |
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| Authors: | LIU Jin-xia ZHOU Yan-jun AN Tong-qing QIU Hua-ji WANG Yun-feng TONG Guang-zhi |
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| Affiliation: | National Key Laboratory of Veterinary Biotechnology , Harbin Veterinary Research Institute, CAAS , Harbin 150001, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | rtGP3 |
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