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花生SSR-PCR体系的优化
引用本文:张 发,万勇善,刘风珍.花生SSR-PCR体系的优化[J].中国农学通报,2008,24(4):37-41.
作者姓名:张 发  万勇善  刘风珍
作者单位:山东农业大学农学院作物生物学国家重点实验室,泰安,271018
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划) , 山东省优秀中青年科学家科研奖励基金
摘    要:以花生品种丰花3号为材料,研究了花生SSR技术中PCR反应体系的主要成分对SSR 扩增效果的影响及不同引物的退火温度。结果表明dNTP 对扩增影响较大,每对引物都有其扩增适合的退火温度。确立了适合花生SSR 分子标记研究的优化体系。最终确定总反应体系为20 μl,其中25 mM MgCl2 1.5 μl,2.5 mM dNTP 1.6 μl,5 U/μl Taq 酶 0.17 μl,100 ng/μl模板DNA 0.4 μl,2.5 mM 引物 5 μl。优化后的扩增程序退火温度为54℃。

关 键 词:微肥    微肥    营养    紫花苜蓿
收稿时间:2008-01-29
修稿时间:2008年1月29日

Optimization of SSR-PCR Reaction System of Peanut
Zhang F,Wan Yongshan,Liu Fengzhen.Optimization of SSR-PCR Reaction System of Peanut[J].Chinese Agricultural Science Bulletin,2008,24(4):37-41.
Authors:Zhang F  Wan Yongshan  Liu Fengzhen
Institution:College of Agronomy, Shandong Agricultural University, State Key Laboratory of Crop Biology, Tai’an 271018
Abstract:FengHua 3 was used in this study to optimize the several factors applied in SSR technique system. dNTP was found to have distinct effect to amplification, and annealing temperature specific to primer pair was also checked. Optimized SSR system for peanut was established : 25 mM MgCl2 1.5 μl, 2.5 mM dNTP 1.6 μl, 5 U/μl Taq 0.17 μl, 100 ng/μl template DNA 0.4 μl, 2.5 mΜ primers 5 μl were added to the PCR mixture. Optimized annealing temperature was 54℃.
Keywords:peanutzz  SSRzz  system optimizationzz
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