| 马动脉炎病毒膜蛋白基因截短型的克隆及其在大肠埃希氏菌中的表达 |
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| 作者姓名： | 杜建 王志亮 宋厚辉 金宁一 张念祖 |
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| 作者单位： | [1]农业部动物检疫所国家外来动物疫病诊断中心，山东青岛266032／／昆明市畜牧兽医站，云南昆明650223 [2]农业部动物检疫所国家外来动物疫病诊断中心，山东青岛266032 [3]中国科学院微生物研究所，北京100088 [4]解放军军需大学病毒基因工程重点实验室，吉林长春130062 [5]农业部热带亚热带动物病毒学重点实验室，云南昆明650224 |
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| 摘 要： | 根据马动脉炎病毒膜蛋白(M)的核苷酸序列，设计合成了1对引物，从pUC18-M质粒中扩增出截短的膜蛋白M基因片段。对该片段及pGEX-6P-1载体双酶切并连接，成功构建了原核表达载体pGEX-6P-Mt。将此重组质粒转化BL21(DE3)宿主菌，对培养条件及诱导表达条件等影响表达的因素进行了优化；诱导后菌体裂解物经SDS-PAGE分析发现，在约34ku处出现了1条特异性的蛋白条带，其分子质量与预期的M截短蛋白的分子质量相符，并随着诱导时间的延长而变化，在诱导后4h达到高峰。结果表明，膜蛋白M基因截短型在大肠埃希氏菌中得到了高效表达。
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| 关 键 词： | 马动脉炎病毒 膜蛋白基因 原核表达载体 |
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