| 猪日本乙型脑炎病毒NS1基因的表达和抗体制备 |
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| 引用本文： | 沈红霞,韩秀杰,赵凡凡,张保新,余风艳,王晓杜. 猪日本乙型脑炎病毒NS1基因的表达和抗体制备[J]. 浙江农林大学学报, 2013, 30(3): 396-400. DOI: 10.11833/j.issn.2095-0756.2013.03.015 |
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| 作者姓名： | 沈红霞 韩秀杰 赵凡凡 张保新 余风艳 王晓杜 |
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| 作者单位： | 1.浙江农林大学 林业与生物技术学院，浙江 临安 311300 |
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| 摘 要： | 猪Sus scrofa domestica日本乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus，JEV）是引起母猪繁殖机能障碍的重要病原之一，其NS1蛋白参与病毒复制和组装、调节宿主免疫反应功能。提取猪日本乙型脑炎上海分离株的基因组RNA，反转录合成cDNA，扩增该病毒的NS1基因片段，亚克隆到原核表达载体pET-28（a）上，构建重组原核表达质粒pET-28（a）-JEV-NS1，转化大肠埃希菌Escherichia co1i BL21（DE3）菌株，IPTG诱导表达重组JEV-NS1蛋白，获得分子量大小为46 kDa的重组蛋白。为了提高表达量，JEV-NS1基因的958~1 245 bp被截短。聚丙烯酰氨凝胶电泳（SDS-PAGE）分析表明:JEV-NS1表达量明显提高，纯化后含量达到总蛋白的85%以上。纯化后的蛋白免疫ICR小鼠Mus musculus，制备了小鼠抗JEV-NS1多克隆抗体，western-blotting验证了JEV-NS1的抗原性和抗体的特异性。图6参13
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| 关 键 词： | 动物学 日本乙型脑炎病毒 NS1 原核表达 纯化 抗体 |
| 收稿时间： | 2012-05-04 |
Expression and antibody preparation of nonstructural protein 1 for Japanese encephalitis virus from pigs |
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| SHEN Hongxia,HAN Xiujie,ZHAO Fanfan,ZHANG Baoxin,YU Fengyan,WANG Xiaodu. Expression and antibody preparation of nonstructural protein 1 for Japanese encephalitis virus from pigs[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2013, 30(3): 396-400. DOI: 10.11833/j.issn.2095-0756.2013.03.015 |
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| Authors: | SHEN Hongxia HAN Xiujie ZHAO Fanfan ZHANG Baoxin YU Fengyan WANG Xiaodu |
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| Affiliation: | 1.School of Forestry and Biotechnology，Zhejiang A & F University，Lin’an 311300，Zhejiang，China |
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