伪狂犬病病毒UL9基因突变株构建及其生物学特性分析 |
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作者姓名: | 阮可悦 桑国菊 童武 许朝阳 于海 单同领 李丽薇 高飞 童光志 郑浩 |
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作者单位: | 1. 中国农业科学院上海兽医研究所;2. 山东农业大学动物科技学院 |
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基金项目: | 国家重点基础研究发展计划(973计划); |
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摘 要: | 伪狂犬病病毒(PRV)是一种大的DNA病毒,编码蛋白众多,其中一些具有酶功能,涉及病毒复制、蛋白调控和核苷酸代谢等。本研究在实验室已有的PRV感染性克隆pBAC-PRV基础上,利用体外转座的方法将Tn5转座子随机插入伪狂犬病病毒基因组中,获得病毒复制相关功能基因UL9的突变体。将UL9基因突变体转染Vero细胞,获得重组病毒vPRV-Tn5-UL9。通过病毒空斑实验和多步生长曲线测定等方法对vPRV-Tn5-UL9的生物学特性进行研究分析,结果显示突变病毒可在体外传代,但病毒的增殖速度显著降低,这表明UL9基因为PRV复制非必需基因,但对病毒复制增殖存在重要影响。此外,动物试验显示,vPRV-Tn5-UL9失去对小鼠的致死能力。本研究成功利用体外转座技术获得了PRV的UL9突变病毒,为构建重组病毒的方法提供了新思路,同时也为研究PRV复制机制打下一定基础。
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关 键 词: | 伪狂犬病病毒 UL9基因 Tn5转座子 BAC |
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