非洲猪瘟病毒EP364R蛋白在杆状病毒表达系统中的表达及鉴定 |
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作者姓名: | 杨扬 张妍 张俊杰 管志欣 李昱昊 孙卿 李宗杰 李蓓蓓 刘珂 邵东华 邱亚峰 魏建超 马志永 |
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作者单位: | 1. 中国农业科学院上海兽医研究所;2. 长江大学动物科学学院 |
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基金项目: | 国家自然科学基金应急项目(31941012); |
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摘 要: | 非洲猪瘟病毒(ASFV)EP364R蛋白是ASFV的ERCC4核酸酶结构域。为了获得具有免疫原性的EP364R蛋白,本研究将ASFV EP364R基因构建到杆状病毒表达载体上,将重组质粒转座DH10Bac感受态中,经过3次蓝白斑筛选,获得重组BacmidEP364R质粒,将Bacmid-EP364R质粒转染至细胞中,收获上清,在正常细胞中传三代,以获得重组杆状病毒rBac-EP364R。使用Western blot和间接免疫荧光(IFA)实验鉴定重组蛋白得到表达及其免疫原性。本研究结果显示,在感染的细胞可检测到EP364R蛋白的表达,并可被His单克隆抗体特异性识别。结果表明杆状病毒系统成功表达EP364R蛋白并具有良好的反应活性,为后续开展ASFV血清学诊断和亚单位疫苗的研究奠定基础。
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关 键 词: | 非洲猪瘟病毒 EP364R 杆状病毒表达 免疫原性 |
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