基于nuc基因的环介导等温核酸扩增可视化技术检测食源性金黄色葡萄球菌 |
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引用本文: | 邹作成,王西,刘雪兰,胡仲皓,田祥强,何晓花,杜晓莉,王佳玲,李柯,刘浩洋,嵇辛勤,胡青海.基于nuc基因的环介导等温核酸扩增可视化技术检测食源性金黄色葡萄球菌[J].中国动物传染病学报,2023(5):108-113. |
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作者姓名: | 邹作成 王西 刘雪兰 胡仲皓 田祥强 何晓花 杜晓莉 王佳玲 李柯 刘浩洋 嵇辛勤 胡青海 |
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作者单位: | 1. 贵州大学动物科学学院;2. 中国农业科学院上海兽医研究所;3. 安徽农业大学动物科技学院 |
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基金项目: | 上海市科技创新项目(农业领域)(21N31900900);;国家重点研发项目(2018YFD0500500); |
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摘 要: | 金黄色葡萄球菌食物中毒主要是由食用被金黄色葡萄球菌及其所产生的肠毒素污染的奶、肉、蛋、糕点、剩饭等蛋白或淀粉含量丰富的食品引起,快速精准的金黄色葡萄球菌检测技术对于保障人们的健康和食品安全具有重要意义。本研究以nuc基因作为检测靶基因,建立了一种检测金黄色葡萄球菌的环介导等温核酸扩增(LAMP)技术。该方法检测金黄色葡萄球菌基因组DNA样品为阳性,而对单细胞增生李斯特菌、鼠伤寒沙门菌、肠出血性大肠杆菌、空肠弯曲菌、小肠结肠炎耶尔森菌和产气荚膜梭菌等食源性致病菌和猪链球菌、胸膜肺炎放线杆菌和多杀性巴氏杆菌等猪源细菌基因组DNA检测结果均为阴性,表明建立的LAMP方法具有较好的特异性。灵敏度的检测结果表明,LAMP的检测限可达5.6×101 CFU/mL,而常规PCR的检测限为5.6×105 CFU/mL,即LAMP的检测灵敏度比常规PCR高出10 000倍。临床样品的检测结果表明,50份猪肉样品中有4份检出金黄色葡萄球菌。本研究为食源性金黄色葡萄球菌提供了一种快速、可视化、特异性好、灵敏度高、成本低的LAMP检测方法。
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关 键 词: | 金黄色葡萄球菌 nuc基因 环介导等温核酸扩增技术 可视化 |
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