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实时荧光定量PCR筛选鸡基因表达最佳内参基因
引用本文:李毅毅,张彦华,吴俊锋,张晨曦,康相涛,李文婷.实时荧光定量PCR筛选鸡基因表达最佳内参基因[J].中国农业大学学报,2021,26(4):71-78.
作者姓名:李毅毅  张彦华  吴俊锋  张晨曦  康相涛  李文婷
作者单位:河南农业大学 动物科技学院, 郑州 450000
基金项目:国家自然科学基金项目(No.31902144);河南省重点研发项目(192102110070);2020年度河南省高等学校重点科研项目(20B23007)
摘    要:为筛选在鸡基因表达时稳定表达的内参基因,本试验以6、14、22及30周龄的地方品种固始鸡与6周龄的商业品种罗斯308肉鸡为试验动物,以B2M、28S、GAPDH、β-actin及HSP70为候选内参基因,利用qRT-PCR对这5个候选内参基因的相对表达量进行测定,通过独立评价软件geNorm、NormFinder、SPSS和Ct值分析法筛选出在不同组织、不同发育时期和不同品种间稳定表达的最佳内参基因。结果表明:在鸡不同组织中,28S为最佳内参基因;在鸡不同发育时期中,GAPDH为最佳内参基因;在不同品种鸡中最佳内参基因组合为GAPDH和28S。综上所述,在以地方品种固始鸡为例的不同组织,不同时期间最佳内参基因分别为28S和GAPDH;以地方品种固始鸡和商业品种罗斯308肉鸡为例的不同品种间最佳内参基因为GAPDH+28S基因组合。综上,本研究筛选出了鸡不同试验条件下的最佳内参基因,为规范鸡基因定量表达分析中内参基因的使用提供参考依据。

关 键 词:  内参基因  geNorm  NormFinder
收稿时间:2020/8/10 0:00:00

Screening optimum reference gene for gene expression in chicken by quantitative real-time PCR
LI Yiyi,ZHANG Yanhu,WU Junfeng,ZHANG Chenxi,KANG Xiangtao,LI Wenting.Screening optimum reference gene for gene expression in chicken by quantitative real-time PCR[J].Journal of China Agricultural University,2021,26(4):71-78.
Authors:LI Yiyi  ZHANG Yanhu  WU Junfeng  ZHANG Chenxi  KANG Xiangtao  LI Wenting
Institution:College of Animal Science and Technology, Henan Agricultural University, Zhengzhou 450000, China
Abstract:
Keywords:chicken  internal reference gene  geNorm  NormFinder
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