| 茶树丙氨酸氨基转移酶基因的克隆与表达分析 |
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| 引用本文： | 白培贤,王丽鸳,韦康,阮丽,成浩,张芬,张成才. 茶树丙氨酸氨基转移酶基因的克隆与表达分析[J]. 茶叶科学, 2016, 0(4): 405-413. DOI: 10.3969/j.issn.1000-369X.2016.04.009 |
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| 作者姓名： | 白培贤 王丽鸳 韦康 阮丽 成浩 张芬 张成才 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院茶叶研究所/国家茶树改良中心/农业部茶树生物学与资源利用重点实验室，浙江 杭州 310008; 中国农业科学院研究生院，北京 100081;2. 中国农业科学院茶叶研究所/国家茶树改良中心/农业部茶树生物学与资源利用重点实验室,浙江 杭州,310008 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31570695)，国家现代农业产业技术体系(nycytx-23)，浙江省农业新品种选育重点专项(2012C2905-4)。 |
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| 摘 要： | 丙氨酸氨基转移酶(Alanine Aminotransferase,Ala AT)是与碳氮代谢相关的一种重要酶类。采用反转录PCR的方法克隆了茶树Cs Ala AT1的c DNA序列,该序列全长1 747 bp,包含一个完整的ORF(1 626 bp),编码541个氨基酸,推导的蛋白质分子量为59.4 k D,理论等电点(p I)为5.82。同源比对结果表明,Cs Ala AT1含有丙氨酸氨基转移酶亚家族保守的辅酶磷酸吡哆醛结合位点,其氨基酸序列与拟南芥At Ala AT1蛋白的相似性为84%。二级结构预测显示该蛋白由α-螺旋(40.67%)、无规则卷曲(29.57%)、β-折叠(13.68%)和延伸链(16.08%)组成,定位于线粒体,不含信号肽与跨膜结构。实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测发现Cs Ala AT1在茶树各组织中均有表达,在根中的表达量最高;Cs Ala AT1基因表达对氮素的响应研究表明,成熟叶中Cs Ala AT1受氮素诱导上调表达,高浓度(1 mmol·L-1 NH4NO3)氮素的诱导效应比低浓度(0.1 mmol·L-1 NH4NO3)氮素诱导效应更强烈;在根中,处理24 h后,高氮诱导Cs Ala AT1上调表达,低氮诱导Cs Ala AT1下调表达。
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| 关 键 词： | 茶树 丙氨酸氨基转移酶 克隆 表达 氮素诱导 |
Cloning and Expression Analysis of Alanine Aminotransferase Gene in Camellia sinensis |
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| BAI Peixian,WANG Liyuan,WEI Kang,RUAN Li,CHENG Hao,ZHANG Fen,ZHANG Chengcai. Cloning and Expression Analysis of Alanine Aminotransferase Gene in Camellia sinensis[J]. Journal of Tea Science, 2016, 0(4): 405-413. DOI: 10.3969/j.issn.1000-369X.2016.04.009 |
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| Authors: | BAI Peixian WANG Liyuan WEI Kang RUAN Li CHENG Hao ZHANG Fen ZHANG Chengcai |
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| Keywords: | tea plant (Camellia sinensis) Alanine aminotransferase cloning expression nitrogen induction |
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