| Error-prone PCR获得EPSP酶突变基因提高水稻的草甘膦抗性 |
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| 引用本文： | 苏军,陈建民,田大刚,朱祯,王锋. Error-prone PCR获得EPSP酶突变基因提高水稻的草甘膦抗性[J]. 分子植物育种, 2008, 6(5) |
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| 作者姓名： | 苏军 陈建民 田大刚 朱祯 王锋 |
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| 作者单位： | 1. 福建农业科学院生物技术研究所,福州,350003
2. 中国科学院遗传与发育生物学研究所,北京,100101 |
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| 摘 要： | 将通过Error-prone PCR方法获得的表达水稻EPSP酶突变基因epsp102和未经修饰的水稻epsp基因分别导入籼稻恢复系明恢86，获得转化克隆84个和109个。对T1、T2代转基因水稻三叶期和分蘖期喷施草甘膦，各选出4个对草甘膦高抗性的T3代材料，进行分子鉴定。对其中的3个株系进行农艺性状考察，并各选1个株系作为父本与其他优良恢复系进行杂交，进一步考察epsp和epsp102基因在不同遗传背景下的抗性和农艺性状表现。Southern结果显示：epsp的整合拷贝数为2～3拷贝，epsp102拷贝数为1-2拷贝。萌发种子、三叶期及分蘖期对草甘膦抗性检测显示：转基因萌发种子对草甘膦的抗性提高15倍；三叶期对草甘膦的抗性提高3-4倍。分蘖期剂量效应检测结果显示：非转基因对照在施0．1倍以上的致死剂量农达时，植株显著失水，而转基因株系水分生理正常。两地两季的农艺性状考察显示：与对照相比转基因株系的穗数明显增多，转基因株系ep-3和ep102-20结实率和单株重与对照没有显著差异；以ep-3和ep102-20作父本，与4个恢复系杂交的F：代对草甘膦的抗性没有降低，两个组合的结实率显著增加，SK／ep-3组合结实率显著下降，其余组合的结实率与对照持平。
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| 关 键 词： | 水稻 Error-prone PCR EPSP酶突变基因 草甘膦 |
A Gene Encodes 5-enol-pyruvylshikimate-3-phosphate Mutagenized by Error-prone PCR Conferred Rice with High Glyphosate-tolerance |
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| Su Jun,Chen Jianmin,Tian Dagang,Zhu Zhen,Wang Feng. A Gene Encodes 5-enol-pyruvylshikimate-3-phosphate Mutagenized by Error-prone PCR Conferred Rice with High Glyphosate-tolerance[J]. Molecular Plant Breeding, 2008, 6(5) |
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| Authors: | Su Jun Chen Jianmin Tian Dagang Zhu Zhen Wang Feng |
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| Abstract: | The rice(Oryza sative L.) epsp gene encodes an enzyme called 5-enol-pyruvylshikimate-3-phosphate(EPSP) synthase,which has been shown as the primary target of the herbicide glyphosate.Both wild type and epsp mutant,namely epsp102 mutagenized by Error-prone polymerase chain reaction,were introduced into rice restorer line Minghui 86 via Agrobacterium tumefaciens-mediated,84 and 109 independent clones were obtained respectively.Glufosinate resistance in T1 and T2 progeny were confirmed under field condition by... |
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| Keywords: | Error-prone PCR |
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