| 特利波契巴尔通体基因敲除体系的建立 |
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| 引用本文： | 杜玉明,蔡雨豪,王蒙,袁聪俐.特利波契巴尔通体基因敲除体系的建立[J].上海交通大学学报(农业科学版),2019(1):61-66. |
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| 作者姓名： | 杜玉明 蔡雨豪 王蒙 袁聪俐 |
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| 作者单位： | 上海交通大学农业与生物学院 |
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| 基金项目： | 闵行区产学研基金 (2016MH237,7Z128010007);四川省省院省校重大项目(2017JZ0010);苏州科技局创新计划(17Z1170010018) |
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| 摘 要： | 本研究旨在建立基于同源重组技术的特利波契巴尔通体基因敲除方法。研究通过扩增并融合Ⅳ型分泌系统VirB4基因的上下游同源片段,将同源片段与pJM05质粒进行体外拼接,并将pJM05-ΔVirB4质粒转化进入S17-1大肠杆菌中;通过双亲接合转移将大肠杆菌S17-1中的pJM05-ΔVirB4质粒转移到特利波契巴尔通体中进行同源臂交换,产生单交换菌株;随后利用质粒中sacB基因表达产物分解蔗糖对自身产生毒性作用,在蔗糖平板中筛选出22个双交换菌株,通过菌落PCR及测序验证,共确定出6个VirB4基因框内缺失菌株;并且测序结果表明这6个菌株在VirB4基因框内缺失了2 136 bp。
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| 关 键 词： | 特利波契巴尔通体 VirB4基因 pJM05质粒 sacB蔗糖筛选 |
| 收稿时间： | 2017/11/26 0:00:00 |
Establishment of in-frame deletion mutant of Bartonellatribocorum |
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| DU Yu-ming,CAI Yu-hao,WANG Meng and YUAN Cong-li.Establishment of in-frame deletion mutant of Bartonellatribocorum[J].Journal of Shanghai Jiaotong University (Agricultural Science),2019(1):61-66. |
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| Authors: | DU Yu-ming CAI Yu-hao WANG Meng and YUAN Cong-li |
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| Institution: | School of Agriculture and Biology,Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200240,China,School of Agriculture and Biology,Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200240,China,School of Agriculture and Biology,Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200240,China and School of Agriculture and Biology,Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200240,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bartonella tribocorum VirB4 plasmid pJM05 sacB-sucrose counter-selection |
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