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猪11β-HSD1真核过表达载体的构建及其在Hepa1-6细胞中的表达
作者姓名:夏吉瀚  王超群  阮进学  杨述林  李奎
作者单位:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京 100193
基金项目:国家科技支撑计划,"863"计划,"973"计划
摘    要:11β-羟类固醇脱氢酶1(11β-HSD1)可使无生物活性的皮质酮催化为有活性的皮质醇,本试验利用长白猪肝脏组织提取的RNA反转录出11β-HSD1基因的cDNA,通过反转录—聚合酶链式反应(RT-PCR)技术和DNA重组技术,将11β-HSD1基因构建到pcDNA3.1真核表达载体上,构建了11β-HSD1-pcDNA重组质粒。通过PCR扩增、酶切电泳和测序分析的方法对重组的质粒进行了鉴定,并将其转染了Hepa1-6细胞,通过RT-PCR检测了其过表达强度。试验结果表明,成功构建了猪11β-HSD1-pcDNA真核过表达载体,为转基因动物的研究奠定了基础。

关 键 词:11β-HSD1  真核表达  基因克隆  载体构建  转基因  
收稿时间:2012-04-11
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