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| 猪hsp70和hsp90荧光定量RT-PCR检测方法的建立 | |
| 引用本文： | 李玉保,鲍恩东,赵茹茜,王志亮. 猪hsp70和hsp90荧光定量RT-PCR检测方法的建立[J]. 南京农业大学学报, 2008, 31(2): 116-120 |
| 作者姓名： | 李玉保 鲍恩东 赵茹茜 王志亮 |
| 作者单位： | 1. 南京农业大学动物医学院,江苏,南京,210095;聊城大学农学院,山东,聊城,252059 2. 南京农业大学动物医学院,江苏,南京,210095 3. 农业部动物检疫所,山东,青岛,266032 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金 , 中-德合作项目 |
| 摘 要： | 根据hsp70、hsp90和GAPDH基因mRNA序列,设计并合成3对引物,将PCR扩增的基因片段克隆到pGEM-T载体,重组质粒经筛选、鉴定,体外转录出RNA,系列稀释作为阳性标准品,用于标准曲线的绘制和样品检测,并用持家蛋白GAPDH基因对样品进行归一化,建立了一步法实时荧光定量RT-PCR技术平台,并对其扩增效率、敏感性、特异性进行了检测.结果证明,建立的一步法荧光定量RT-PCR技术可以真实地反映反应管中模板的数量,可用于猪hsp70、hsp90和GAPDH基因mRNA水平的检测. |
| 关 键 词： | 猪 hsp70 hsp90 GAPDH 荧光定量RT-PCR |
| 文章编号： | 1000-2030(2008)02-0116-05 |
| 修稿时间： | 2007-04-03 |
Development of fluorescence quantitative RT-PCR for detection of hsp70 and hsp90 mRNA from pigs |
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| LI Yu-bao,BAO En-dong,ZHAO Ru-qian,WANG Zhi-liang. Development of fluorescence quantitative RT-PCR for detection of hsp70 and hsp90 mRNA from pigs[J]. Journal of Nanjing Agricultural University, 2008, 31(2): 116-120 | |
| Authors: | LI Yu-bao BAO En-dong ZHAO Ru-qian WANG Zhi-liang |
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