硒诱导的黄瓜耐镉转录本鉴定分析及表达载体构建 |
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引用本文: | 王小云,孙红艳,史梦,于佳.硒诱导的黄瓜耐镉转录本鉴定分析及表达载体构建[J].江苏农业科学,2023(11):46-53. |
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作者姓名: | 王小云 孙红艳 史梦 于佳 |
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作者单位: | 1. 山西农业大学水土保持科学研究所;2. 太原科技大学环境与资源学院 |
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基金项目: | 山西省重点研发计划(编号:201903D221066);;国家自然科学基金(编号:31401319); |
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摘 要: | 以黄瓜乙烯响应因子CsERF7转录本为研究对象,通过外源硒缓解黄瓜镉胁迫试验分析其表达及黄瓜生长状况,并克隆CsERF7基因,构建过表达载体转化拟南芥,同时分析CsERF7的理化性质和功能。结果表明,外源硒显著升高了镉胁迫引起的黄瓜生长指标的降低,CsERF7在镉处理下的表达丰度是对照的56%,而镉+硒比单独镉处理上调表达4.53倍,与RNA-seq结果相符,此基因可能在硒调控黄瓜镉胁迫响应中起作用。同时,成功构建超表达载体pEGOEP35S-H-ERF7-GFP,转化拟南芥获得转基因株系。生物信息学分析表明,黄瓜CsERF7基因属于AP2/ERF家族的AP2亚家族,开放阅读框ORF长度588 bp,编码196个氨基酸,有1个AP2结构域;该蛋白属于非跨膜亲水性蛋白,亚细胞定位预测定位在线粒体中,存在22个氨基酸磷酸化位点;其二级结构主要由α-螺旋和延伸链构成,与三级结构预测结果高度一致,所得蛋白序列与黄瓜、甜瓜同源性最高。
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关 键 词: | 黄瓜 ERF 基因克隆 过表达载体构建 生物信息分析 |
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