NaHCO3胁迫下刚毛柽柳叶片蛋白质差异表达谱的建立 |
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引用本文: | 索慧英,刘静,曲冠证,郑密,李莹.NaHCO3胁迫下刚毛柽柳叶片蛋白质差异表达谱的建立[J].北京林业大学学报,2018,40(9):15-24. |
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作者姓名: | 索慧英 刘静 曲冠证 郑密 李莹 |
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作者单位: | 1.东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室,黑龙江 哈尔滨 150040 |
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基金项目: | 东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室创新项目2013B08国家自然科学基金项目31300554 |
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摘 要: | 目的为了研究刚毛柽柳响应盐胁迫的作用机制, 本研究以刚毛柽柳叶片为材料, 对叶片总蛋白质的提取方法进行优化, 探究出适用于双向电泳的刚毛柽柳叶片总蛋白质的提取方法, 并建立NaHCO3胁迫下刚毛柽柳叶片差异蛋白质的表达谱。方法本研究比较了改良Tris-三氯乙酸, 改良Tris-三氯乙酸+PVP40, 改良Tris-三氯乙酸+丙酮和植物蛋白提取试剂盒法4种提取植物蛋白质的方法提取刚毛柽柳叶片总蛋白质的差异, 并利用蛋白质双向电泳用技术研究NaHCO3胁迫后刚毛柽柳叶片蛋白质表达变化, 建立了盐胁迫下刚毛柽柳叶片差异蛋白表达谱。结果采用改良Tris-三氯乙酸法提取刚毛柽柳叶片蛋白质, 利用该方法可获得高质量的蛋白质样品, 所得到的双向电泳凝胶图谱中蛋白质分离效果好、图谱分辨率高, 通过ImageMaster 2D Platinum 7.0凝胶分析软件对NaHCO3处理0和12 h的双向电泳凝胶图谱进行分析, 获得了25个响应盐胁迫的差异表达蛋白质, 并分析了差异表达蛋白量的变化。结论研究结果表明, 利用改良Tris-三氯乙酸法提取刚毛柽柳叶片蛋白质适用于双向电泳体系, 该方法可以用于对刚毛柽柳叶片蛋白质组学的研究。本研究建立了NaHCO3胁迫下刚毛柽柳叶片差异蛋白质的表达谱, 为进一步分析刚毛柽柳耐盐分子机制奠定了基础。
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关 键 词: | 刚毛柽柳叶片 改良Tris-三氯乙酸法 蛋白质提取 双向凝胶电泳 盐胁迫 |
收稿时间: | 2018-06-20 |
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