| dGFP-GUS基因标记新疆棉花黄萎病原菌的研究 |
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| 引用本文： | 孔德真,华东来,王秀珍,刘步仓,祝建波,王爱英.dGFP-GUS基因标记新疆棉花黄萎病原菌的研究[J].新疆农业科学,2016,53(1):1. |
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| 作者姓名： | 孔德真 华东来 王秀珍 刘步仓 祝建波 王爱英 |
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| 作者单位： | 新疆石河子大学生命科学学院,新疆石河子,832000 |
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| 摘 要： | 目的]研究棉花黄萎病原菌的入侵机理.方法]以带有潮霉素抗性筛选基因的PUCCATPH载体以及pCAMBIA1304载体作为骨架,构建trpc启动子驱动的GFP-GUS基因的新疆棉花黄萎病菌表达载体1304-P-ORF,导入农杆菌GV3101和AGL-1中.通过农杆菌介导(ATMT)法分别转入新疆棉花黄萎病原菌VD-1和VD-278中,对表达效果进行检测.结果]筛选的潮霉素B浓度为30 μg/mL,农杆菌AGL-1对黄萎病菌的转化效率比GV3101高40;.T0代经含有潮霉素B的PDA培养基筛选,获得了T1代转基因大丽轮枝菌VD-12株,VD-2 784株.通过GUS组织染色,在转基因VD-1和VD-278的菌丝和孢子中均可观察到GUS基因的表达.对转基因黄萎菌进行PCR分子检测,均可检测到GFP和潮霉索B基因.GUS-GFP和潮霉素B基因已成功转入新疆棉花黄萎菌VD-1和VD-278中.结论]建立了新疆棉花黄萎菌的遗传转化体系,为进一步利用GFP-GUS基因研究新疆棉花黄萎菌对棉花侵染的过程奠定基础.
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| 关 键 词： | trpc启动子 农杆菌介导转化 GFP-GUS 棉花黄萎病菌 |
| 收稿时间： | 2016-01-25 |
dGFP-GUS Genes Tagged of Verticillium Dahliae of Cotton in Xinjiang |
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| KONG De-zhen,HUA Dong-lai,WANG Xiu-zhen,LIU Bu-cang,ZHU Jian-bo,WANG Ai-ying.dGFP-GUS Genes Tagged of Verticillium Dahliae of Cotton in Xinjiang[J].Xinjiang Agricultural Sciences,2016,53(1):1. |
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| Authors: | KONG De-zhen HUA Dong-lai WANG Xiu-zhen LIU Bu-cang ZHU Jian-bo WANG Ai-ying |
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