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水疱性口炎病毒RT-LAMP快速检测方法的研究
引用本文:罗琼,田纯见,林志雄,陈茹,朱道中,黄青云. 水疱性口炎病毒RT-LAMP快速检测方法的研究[J]. 畜牧与兽医, 2009, 41(7)
作者姓名:罗琼  田纯见  林志雄  陈茹  朱道中  黄青云
作者单位:1. 广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心,广东,广州,510623
2. 华南农业大学兽医学院,广东,广州,510642
基金项目:广东出入境检验检疫局科技项目 
摘    要:根据逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)原理,针对水疱性口炎病毒(VSV)糖蛋白G基因序列中的6个区域设计内外各1对特异引物,建立扩增VSV糖蛋白(G)基因的RT-LAMP方法。扩增产物电泳呈特异的阶梯状条带分布,扩增产物加SYBR GREEN I染色呈特征性的黄绿色,肉眼可直接观察判定。同时,还建立了可以进行定量检测的实时RT-LAMP方法。特异性试验显示,本方法可快速检验鉴别VSV与口蹄疫病毒(FMDV)和猪水泡病病毒(SVDV)。敏感性试验显示,建立的实时RT-LAMP方法检测VSVRNA的最低检测量为0.01 PFU,比实时荧光RT-PCR显著提高。建立的LAMP方法可检测p-VSVNJ质粒DNA的最低量为6.36×10-3pg/μL(1.4×103copies/μL),比PCR也显著提高。综合表明,本研究建立RT-LAMP检测VSV的方法具有特异、敏感、快速、简便的特点,具有开发应用前景。

关 键 词:水疱性口炎病毒  糖蛋白基因  克隆  逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)

Rapid detection of vesicular stomatitis virus by reverse transcription loop-mediated isothermal amplification (RT-LAMP)
LUO Qiong,TIAN Chun-jian,LIN Zhi-xiong,CHEN Ru,ZHU Dao-zhong,HUANG Qing-yun. Rapid detection of vesicular stomatitis virus by reverse transcription loop-mediated isothermal amplification (RT-LAMP)[J]. Animal Husbandry & Veterinary Medicine, 2009, 41(7)
Authors:LUO Qiong  TIAN Chun-jian  LIN Zhi-xiong  CHEN Ru  ZHU Dao-zhong  HUANG Qing-yun
Abstract:
Keywords:
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