水稻立枯病原菌尖孢镰孢菌致病力降低T-DNA突变体的筛选与插入位点鉴定

为深入研究水稻立枯病原菌尖孢镰孢菌（Fusarium oxysporum Schelcht）致病分子机理，利用根癌农杆菌介导遗传转化技术构建尖孢镰孢菌突变体库，筛选致病力降低突变体，检测其T-DNA插入数量和位点。结果表明，691个突变体库构建成功，且突变体可稳定遗传后代。选取34个不同菌落形态变化突变体测定其致病力，筛选到6个致病力降低最严重突变体，分析其菌落形态、菌落生长速率和产孢量。与野生型相比，菌落形态存在差异，其中4个突变体B9、C36、D65、E17生长速率降低，6个突变体产孢数量均降低。通过Southern blot分析发现突变体B92有两个T-DNA插入，其余5个突变体为单个T-DNA插入，利用Hi TAIL-PCR确定6个突变体T-DNA插入位点。结果有助于更好理解尖孢镰孢菌与水稻之间分子相互作用，为进一步确定尖孢镰孢菌致病基因及其功能提供参考。