| gga-miRNA-155对MDCC-MSB1细胞增殖的影响 |
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| 引用本文： | 余祖华,丁 轲,郁 川,等. gga-miRNA-155对MDCC-MSB1细胞增殖的影响[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2019, 47(2): 1-6 |
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| 作者姓名： | 余祖华 丁 轲 郁 川 等 |
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| 作者单位： | 河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室;河南科技大学宏翔生物饲料实验室;洛阳市活载体生物材料与动物疫病防控重点实验室;大理大学基础医学院;云南...;吉林大学第二医院肝胆胰内...;武警后勤学院卫生勤务学系...;云南农业大学动物营养与饲...;北京航天总医院肾内科;成...;甘肃农业大学动物医学院;...;北京工业大学生命科学与生...;河南科技大学动物疫病与公...;宁夏医科大学生育力保持教...;中国医学科学院医学实验动... |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（U1504308，31702207）；河南科技大学博士科研启动基金项目(13480068)；河南科技大学省部级科技创新平台培育项目（2015SPT004） |
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| 摘 要： | 【目的】构建gga-miRNA-155前体基因(pre-gga-miRNA-155)真核表达载体,验证gga-miRNA-155在MDCC-MSB1细胞中的表达效果,探究其对MDCC-MSB1细胞增殖的影响。【方法】采用PCR方法从鸡肝脏基因组DNA中扩增gga-miRNA-155前体基因片段pre-gga-miRNA-155,并将其克隆入pMD-18T载体,构建克隆载体pMD-18T-pre-gga-miRNA-155。用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切pcDNA6.2-GW/EmGFP-miRNA真核表达载体和pMD-18T-pre-gga-miRNA-155,将pre-gga-miRNA-155酶切回收片段与pcDNA6.2-GW/EmGFP-miRNA的酶切回收片段进行连接,构建重组真核表达载体pcDNA6.2-pre-gga-miRNA-155,对其进行PCR、EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切及DNA测序鉴定。将重组载体转染到MDCC-MSB1细胞中,应用实时荧光定量PCR (Real-time PCR)检测gga-mi-RNA-155的表达水平,利用MTT法检测细胞增殖能力的变化。【结果】PCR扩增获得了长度约154bp的鸡pre-gga-mi-RNA-155基因。成功构建了pre-gga-miRNA-155的真核表达载体pcDNA6.2-pre-gga-miRNA-155,瞬时转染MD-CC-MSB1细胞后gga-miRNA-155表达水平显著增加,且MDCC-MSB1细胞的体外增殖能力增强。【结论】成功构建了pre-gga-miRNA-155的真核表达载体,其可在MDCC-MSB1细胞中过表达gga-miRNA-155,且可促进MDCC-MSB1细胞的体外增殖。
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| 关 键 词： | gga-miRNA-155；表达载体；MDCC-MSB1细胞；细胞增殖 |
| 收稿时间： | 2017-10-15 |
Effects of gga-miRNA-155 on proliferation of MDCC-MSB1 cell |
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| YU Zuhu,DING Ke and YU Chuan,et al. Effects of gga-miRNA-155 on proliferation of MDCC-MSB1 cell[J]. Journal of Northwest A&F University（Natural Science Edition）, 2019, 47(2): 1-6 |
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| Authors: | YU Zuhu DING Ke YU Chuan et al |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | gga-miRNA-155 expression vector MDCC-MSB1cell cell proliferation |
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