| 长白猪λ-干扰素基因的原核表达与分析 |
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| 作者姓名： | 赵英杰 徐宏军 李尚波 王文成 卫广森 宣华 |
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| 作者单位： | [1]辽宁益康生物制品有限公司研发中心,辽宁辽阳111000 [2]中国农业科学院兰州兽医研究所,甘肃兰州730046 [3]吉林大学农学部畜牧兽医学院,吉林长春130062 |
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| 摘 要： | 以含长白猪IFN-λ基因的质粒载体为模板，用原核表达引物扩增了长白猪IFN-λ，基因，将其定向克隆至原核表达载体pET28b的EcoRI和XhoI位点，构建了长白猪IFN-λ基因的原核表达载体pET28b-PoIFN-λ。经酶切、PCR鉴定，表明所构建的重组质粒为特异性长白猪IFN-λ，基因原核表达质粒。将该重组质粒转化大肠埃希氏菌BL21（DE3）细胞，阳性菌落筛选、SDS-PAGE分析以及Western-blotting分析表明，成功构建了表达重组猪IFN-λ的大肠埃希氏菌基因工程菌株。亚细胞定位分析表明，目的蛋白经原核表达后主要以不溶性包涵体形式存在，其他少量可溶性目的蛋白存在于细胞浆中。
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| 关 键 词： | 长白猪 IFN-λ 原核表达 亚细胞定位 Western-blotting分析 |
| 文章编号： | 1673-4696（2006）01-0046-06 |
| 收稿时间： | 2005-08-05 |
| 修稿时间： | 2005-11-28 |
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