| 柔嫩艾美耳球虫子孢子高表达新基因的克隆、表达及分析 |
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| 引用本文： | 李洋,韩红玉,董辉,赵其平,姜连连,朱顺海,郭涛,平宪卿,马卫娇,曾艳波,程军,黄兵.柔嫩艾美耳球虫子孢子高表达新基因的克隆、表达及分析[J].中国预防兽医学报,2010,32(5). |
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| 作者姓名： | 李洋 韩红玉 董辉 赵其平 姜连连 朱顺海 郭涛 平宪卿 马卫娇 曾艳波 程军 黄兵 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院上海兽医研究所,农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海,200241 |
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| 基金项目： | 上海市自然科学基金，国家高技术研究发展计划(863计划)，中央级公益性科研院所基本科研业务费项目 |
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| 摘 要： | 为克隆和研究柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)新基因,本研究在所获得的ESTs序列的基础上,应用RACE技术克隆获得了1个在子孢子阶段高表达新基因的全长cDNA序列(GU553107),命名为ZB7-C11,该基因全长1439bp,ORF为525bp,编码174个氨基酸,预测表达蛋白的分子量约为18.7ku。Real-timePCR对E.tenella不同发育阶段(未孢子化卵囊、孢子化卵囊、子孢子和裂殖子)表达量进行分析显示,该基因在子孢子阶段的表达高于其它阶段。另外,将ZB7-C11克隆于pGEX-4T中构建重组质粒pGEX-4T-C11,转化大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达6h后其表达量最高,并且重组蛋白分子量约44.7ku大部分以可溶性存在。Westernblot分析显示该重组蛋白可被抗E.tenella的多克隆抗血清识别,表明该蛋白具有较好的反应原性。该结果为进一步研究该基因的生物学功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | 柔嫩艾美耳球虫 子孢子 克隆 表达 |
Cloning and expression of a novel gene from Eimeria tenella |
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| LI Yang,HAN Hong-yu,DONG Hui,ZHAO Qi-ping,JIANG Lian-lian,ZHU Shun-hai,GUO Tao,PING Xian-qing,MA Wei-jiao,ZENG Yan-bo,CHENG Jun,HUANG Bing.Cloning and expression of a novel gene from Eimeria tenella[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2010,32(5). |
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| Authors: | LI Yang HAN Hong-yu DONG Hui ZHAO Qi-ping JIANG Lian-lian ZHU Shun-hai GUO Tao PING Xian-qing MA Wei-jiao ZENG Yan-bo CHENG Jun HUANG Bing |
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