一步法实时定量RT-PCR检测小反刍兽疫病毒方法的建立 |
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引用本文: | 包静月,李林,王志亮,李金明,刘春菊,肖肖.一步法实时定量RT-PCR检测小反刍兽疫病毒方法的建立[J].中国动物检疫,2007,24(8):21-23. |
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作者姓名: | 包静月 李林 王志亮 李金明 刘春菊 肖肖 |
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作者单位: | 中国动物卫生与流行病学中心国家外来动物疫病诊断中心,青岛,266032 |
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基金项目: | 农业部储备项目;引进国际先进农业科技计划(948计划) |
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摘 要: | 建立了检测小反刍兽疫病毒的快速、特异的基于Taqman的一步法实时定量RT-PCR方法。通过对GenBank已公布的小反刍兽疫病毒N基因序列进行序列比较分析,设计了一对特异性引物和一条Taqman探针。利用这对引物和探针对来自不同疫源地的小反刍兽疫病毒RNA样本进行检测,都获得了特异性扩增,但是,不与牛瘟病毒、海豚麻疹病毒等其他种的麻疹病毒属病毒发生交叉反应。本方法具有高度灵敏性,最低可检测到810拷贝的RNA模板。在模板浓度为8.1×102到8.1×108拷贝范围内,都呈现良好的线性关系,而且无论是组内和或组间重复的变异系数都很低。
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关 键 词: | 小反刍兽疫病毒 一步法实时定量RT-PCR 检测 |
文章编号: | 1005-944X(2007)08-0021-03 |
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