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| 表达Omp31基因重组牛布鲁菌的构建及鉴定 | |
| 作者单位： | ;1.吉林农业大学动物科技学院;2.军事医学科学院军事兽医研究所;3.江苏省农业科学院兽医研究所;4.中国农业科学院特产研究所 |
| 摘 要： | 为提高布鲁菌疫苗株的免疫保护效果,本试验以牛布鲁菌疫苗株S19为研究对象,将羊布鲁菌Omp31基因克隆、扩增并插入至广宿主质粒pBBR1MCS-2中,构建重组质粒pBBR1MCS-Omp31;通过电转化的方式转入S19感受态细胞中,经抗性基因筛选和PCR验证,获得重组牛布鲁菌S19-Omp31株;该重组菌株连续传25代未发现重组质粒和Omp31基因丢失,表明其遗传稳定性良好;进一步经SDS-PAGE检测可见约26 000相对分子质量的目的条带,采用Western blot法检测显示目的蛋白可与His单克隆抗体及Omp31蛋白高免血清反应。本研究构建的重组牛布鲁菌S19-Omp31株能够稳定表达目的基因,为进一步开展S19-Omp31株的免疫效果评价奠定基础。 |
| 关 键 词： | 牛布鲁菌 Omp31基因 重组细菌活载体 疫苗候选株 |
Construction and identification of recombinant Brucella abortus expressing Omp31 gene |
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| Keywords: | |
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