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H10亚型和N8亚型禽流感病毒三重RT-PCR检测方法的建立
引用本文:罗思思,谢芝勋,谢志勤,谢丽基,邓显文,范 晴,黄娇玲,张艳芳,王盛,曾婷婷,张民秀. H10亚型和N8亚型禽流感病毒三重RT-PCR检测方法的建立[J]. 中国兽药杂志, 2019, 53(4): 1-5
作者姓名:罗思思  谢芝勋  谢志勤  谢丽基  邓显文  范 晴  黄娇玲  张艳芳  王盛  曾婷婷  张民秀
作者单位:广西壮族自治区兽医研究所,,,,,,,,,,
基金项目:广西科技重大专项(桂科AA17204057);广西科技基地和人才专项(桂科AD17195083)和广西自然科学基金(2015GXNSFBA139070).
摘    要:根据基因库中H10亚型禽流感病毒(AIV)HA基因、N8亚型AIV NA基因和所有亚型AIV M基因序列,分别设计筛选出3对特异性引物,优化引物之间的浓度,建立了H10亚型和N8亚型AIV三重RT-PCR检测方法。该法对含有H10和N8亚型AIV的模板可特异性扩增出267 bp(H10亚型AIV)、464 bp(N8亚型AIV)和693 bp(AIV)目的条带,对H10亚型AIV扩增出267、693 bp目的条带,对N8亚型AIV扩增出464、693 bp目的条带,对其他亚型AIV仅扩增出693 bp目的条带,对常见禽病病原体均未扩增出任何条带。该法对H10亚型和N8亚型AIV检测下限为10~3拷贝/μL。120份临床样品检测结果与病毒分离鉴定一致。研究建立的H10亚型和N8亚型AIV三重RT-PCR检测方法特异性强、灵敏度高,为同时快速鉴别检测H10亚型和N8亚型AIV提供一种简便、快速和有效的方法。

关 键 词:禽流感病毒  H10亚型  N8亚型  三重RT-PCR
收稿时间:2018-11-21
修稿时间:2019-04-05

Development of a triplex RT-PCR assay for detection of H10N8 subtype avian influenza virus
Affiliation:Guangxi Veterinary Research Institute,Guangxi Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,,,,,,,,,,
Abstract:
Keywords:Avian influenza virus   H10N8 subtype   Triplex RT-PCR
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