| 羊鞭虫病实时荧光PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 于志超,陈林军,赵治国,崔强,延涵,王海艳,赵林立,李刚.羊鞭虫病实时荧光PCR检测方法的建立[J].中国兽医学报,2019(10):1981-1986. |
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| 作者姓名： | 于志超 陈林军 赵治国 崔强 延涵 王海艳 赵林立 李刚 |
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| 作者单位： | 1.内蒙古出入境检验检疫局技术中心 |
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| 基金项目： | 内蒙古检验检疫局自立科技基金资助项目(NMCIQ-IK2017-012) |
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| 摘 要： | 为建立一种快速检测羊鞭虫病实时荧光PCR方法,根据GenBank已经公布的羊鞭虫(Trichuris ovis)ITS基因序列(登录号:JF680987.1),设计特异性引物和TaqMan探针,以重组质粒作为绝对定量模板,建立检测羊鞭虫病的TaqMan实时荧光PCR方法。对反应体系的特异性、敏感性和稳定性进行评价,并用该方法对临床样品进行检测。结果显示,该检测方法线性关系良好,标准曲线的相关系数R^2=0.994,扩增效率E=1.05。该方法特异性强,与其他8种常见家畜寄生性线虫病不发生交叉反应;灵敏度高,最低检出下限为31.7拷贝/μL;重复性好,组内和组间变异系数分别为0.43%~1.04%和1.20%~1.91%,均小于2.00%。用建立的实时荧光PCR方法和显微镜检查方法分别对20份临床样品进行检测,实时荧光PCR和显微镜检查方法检出的阳性样品分别为14和9份。本研究建立的TaqMan实时荧光PCR方法能在粪便中快速、准确、灵敏检测羊鞭虫卵,为羊鞭虫病的检测和防控提供新的方法。
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| 关 键 词： | 鞭虫 ITS基因 TAQMAN探针 实时荧光PCR |
Establishment of a TaqMan real-time PCR for detection of Trichuriasis in sheep |
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| YU Zhi-chao,CHEN Lin-jun,ZHAO Zhi-guo,CUI Qiang,YAN Han,WANG Hai-yan,ZHAO Lin-li,LI Gang.Establishment of a TaqMan real-time PCR for detection of Trichuriasis in sheep[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2019(10):1981-1986. |
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| Authors: | YU Zhi-chao CHEN Lin-jun ZHAO Zhi-guo CUI Qiang YAN Han WANG Hai-yan ZHAO Lin-li LI Gang |
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| Institution: | (Technology Center of Inner Mongolia Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau , Hohhot 010020 , China) |
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| Abstract: | YU Zhi-chao;CHEN Lin-jun;ZHAO Zhi-guo;CUI Qiang;YAN Han;WANG Hai-yan;ZHAO Lin-li;LI Gang(Technology Center of Inner Mongolia Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau , Hohhot 010020 , China) |
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| Keywords: | Trichuris ovis ITS gene TaqMan probe real-time PCR |
| 本文献已被 CNKI 维普 等数据库收录！ |
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