白木香基因组DNA提取与ISSR反应体系的优化 |
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作者姓名: | 邹枚伶 夏志强 王文泉 |
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作者单位: | 中国热带农业科学院/热带生物技术研究所,海南,海口,571101
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基金项目: | 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项基金? |
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摘 要: | 白木香为瑞香科沉香属植物,是中国特有的珍贵药用植物,也是国产沉香药材唯一资源植物,现已濒临灭绝,被载入<中国植物红皮书>采用改良CTAB法提取白木香DNA较传统方法简单高效.通过琼脂糖凝胶电泳和OD260/OD280比值测定,所得基因组DNA纯度高,可作为ISSR等以PCR为基础的DNA多态性标记.通过优化影响白木香ISSR-PCR的主要参数,确立了适用于白木香的ISSR反应体系和扩增条件.结果表明在20μl反应体中,模板DNA、引物、Mg2+、dNTP和Taq DNA聚合酶5种主要成分的最适浓度分别为25 ng、0.8 μmol/L、2.5 mm01/L、0.2 mmol/L、1.0 U,扩增出足量产物至少需要35个循环.
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关 键 词: | 白木香 DNA提取 PCR反应体系 |
Optimization for Extracting Total DNA and ISSR-PCR System in Aquilaria sinensis (Lour.) Spreng |
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Authors: | Meiling Zou |
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Abstract: | |
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Keywords: | ISSR |
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