| 异硫氰酸荧光素标记鳗弧菌条件优化及应用条件对荧光信号的影响 |
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| 引用本文： | 王锐,王秀华,王玉娟,韩雯,黄倢. 异硫氰酸荧光素标记鳗弧菌条件优化及应用条件对荧光信号的影响[J]. 水产学报, 2014, 38(4): 593-600 |
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| 作者姓名： | 王锐 王秀华 王玉娟 韩雯 黄倢 |
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| 作者单位： | 中国海洋大学,中国水产科学院黄海水产研究所 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（31172440）皂角苷增强海水鱼类细菌疫苗浸泡免疫效果的作用机理。 |
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| 摘 要： | 为了实现对目标细菌的有效示踪,实验以异硫氰酸荧光素(FITC)为标记物,分别设置FITC标记浓度0.2、2、20、50、100、200μg/mL,标记时间1、15、30、60、120、240 min,研究了FITC标记浓度与标记时间对鳗弧菌标记效果的影响,同时对在不同温度(25、4、-20、-70℃)及不同时间(24、48、96、192 h)存储条件下鳗弧菌标记荧光的稳定性进行了比较,对标记鳗弧菌经甲醛灭活后的荧光变化进行了观察,研究了不同光照条件(0、150、1 500、25 000 lx)对标记鳗弧菌的荧光衰减影响,以及在-20和-70℃条件下反复冻融对标记鳗弧菌荧光强度的影响。结果表明,FITC的最适标记浓度范围为20~100μg/mL,最适标记时间范围60~120 min,储藏在-20和-70℃条件下,标记后的鳗弧菌荧光信号比储藏在4和25℃条件下稳定,标记后的鳗弧菌经甲醛灭活后的荧光信号稳定性优于对照组,不同强度自然光照对标记鳗弧菌的荧光衰减效果不明显,标记细菌经3次冻融,发现在-70℃条件下冻存的细菌荧光信号稳定性保持良好。本研究结果为FITC用于标记海洋细菌提供了实用的技术参数。
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| 关 键 词： | 异硫氰酸荧光素 鳗弧菌 荧光标记 标记条件 |
| 收稿时间： | 2013-11-19 |
| 修稿时间： | 2014-02-19 |
Optimizing conditions of fluorescein isothiocyanate labeled Vibrio anguillarum and the effect of application condition on fluorescence signal |
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| WANG Rui,WANG Xiuhu,WANG Yujuan,HAN Wen and HUANG Jie. Optimizing conditions of fluorescein isothiocyanate labeled Vibrio anguillarum and the effect of application condition on fluorescence signal[J]. Journal of Fisheries of China, 2014, 38(4): 593-600 |
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| Authors: | WANG Rui WANG Xiuhu WANG Yujuan HAN Wen HUANG Jie |
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| Affiliation: | Ocean University of China,Yellow Sea Fisheries Research Institute |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | fluorescein isothiocyanate Vibrio anguillarum fluorescence labeling labeling conditions |
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