| 基因Ⅰ型草鱼呼肠孤病毒TaqMan Real-Time PCR检测方法的建立及应用 |
| |
| 引用本文： | 殷亮,王庆,曾伟伟,李永刚,王英英,刘春,梁红茹,石存斌,吴淑勤. 基因Ⅰ型草鱼呼肠孤病毒TaqMan Real-Time PCR检测方法的建立及应用[J]. 水产学报, 2014, 38(4): 570-576 |
| |
| 作者姓名： | 殷亮 王庆 曾伟伟 李永刚 王英英 刘春 梁红茹 石存斌 吴淑勤 |
| |
| 作者单位： | 珠江水产研究所，上海海洋大学水产与生命学院,珠江水产研究所 |
| |
| 基金项目： | 国家科技支撑计划(2012BAD25B02),国家自然科学基金(31202026) |
| |
| 摘 要： | 为了建立和应用可检测基因Ⅰ型草鱼呼肠孤病毒(GCRV)的荧光定量检测方法,实验根据基因Ⅰ型GCRV的S6保守序列,分别设计扩增目的条带661 bp普通引物(P1、P2)、扩增目的条带159 bp荧光定量引物(F1、F2)和一条探针;同时构建含有目的片段的PVAX1-S6作为标准质粒,10倍梯度稀释构建质粒拷贝数与Ct值的标准曲线(Y=-3.389X+38.076)。结果表明,此方法在3.9×107~3.9×101拷贝/μL之间相关性较好,R2为0.992,最小检测量为4拷贝/μL;且与基因Ⅱ型、Ⅲ型GCRV以及其他病原核酸无交叉反应。运用该方法检测16份草鱼出血病疑似样品,阳性结果为4份;而普通PCR检测仅2份显示阳性。本研究建立了针对基因Ⅰ型GCRV的荧光定量检测方法,具有高效、特异、灵敏、可重复性强的优点,适合于目前基因Ⅰ型GCRV的临床快速检测和病毒定量分析。
|
| 关 键 词： | 草鱼呼肠孤病毒 基因I型 Real-Time PCR 定量分析 |
| 收稿时间： | 2013-10-26 |
| 修稿时间： | 2014-03-03 |
Establishment and application of a TaqMan real-time PCR assay for detection of grass carp reovirus genotype I |
| |
| YIN Liang,WANG Qing,ZENG Weiwei,LI Yonggang,WANG Yingying,LIU Chun,LIANG Hongru,SHI Cunbin and WU Shuqin. Establishment and application of a TaqMan real-time PCR assay for detection of grass carp reovirus genotype I[J]. Journal of Fisheries of China, 2014, 38(4): 570-576 |
| |
| Authors: | YIN Liang WANG Qing ZENG Weiwei LI Yonggang WANG Yingying LIU Chun LIANG Hongru SHI Cunbin WU Shuqin |
| |
| Affiliation: | Pearl River Fisheries Research Institute,College of Fisheries and Life Science, Shanghai Ocean University,Pearl River Fisheries Research Institute |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | grass carp reovirus (GCRV) genotype I TaqMan real-time PCR quantitative analysis |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《水产学报》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《水产学报》下载全文 |
|
