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| 红鳍东方鲀防御素db-1基因的原核表达分析 | |
| 作者单位： | ;1.大连海洋大学农业部北方海水增养殖重点实验室 |
| 摘 要： | 采用原核表达方法高效表达红鳍东方鲀Takifugu rubripes防御素db-1基因,并获得该基因的重组表达产物。通过RT-PCR扩增获得红鳍东方鲀防御素db-1基因成熟肽编码序列,将其连入pET32a+载体,构建原核表达载体pET32a-m DB-1,然后将其转入至大肠杆菌表达菌株Rosetta(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导目的基因表达,通过SDS-PAGE和Western Blotting检测该蛋白,并利用Ni-NTA亲和层析纯化该蛋白,最后以Anti-Mus defensin Beta2抗体为探针的Elisa反应鉴定该蛋白。结果表明:红鳍东方鲀db-1基因在大肠杆菌中高效表达,并纯化得到了这种重组防御素融合蛋白。本研究中提供了一种简单、高效获取重组防御素蛋白的方法,可为其应用和生产提供支持。 |
| 关 键 词： | 红鳍东方鲀 防御素 原核表达 Elisa分析 |
Cloning and prokaryotic expression of defensin db-1 gene from redfin puffer Takifugu rubripes |
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