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DNA免疫技术制备H10亚型禽流感病毒HA蛋白单因子血清的研究
引用本文:高鑫鑫,郭 晶*,薛 睿,赵聪慧,李旭勇*.DNA免疫技术制备H10亚型禽流感病毒HA蛋白单因子血清的研究[J].中国兽药杂志,2020,54(3):15-20.
作者姓名:高鑫鑫  郭 晶*  薛 睿  赵聪慧  李旭勇*
作者单位:聊城大学 农学院,聊城大学 农学院,,,
基金项目:国家自然科学基金(31702262, 31702261);山东省自然科学基金 (ZR2017BC057, ZR2017BC048);聊城大学实验技术研究基金资助(26322170257,26322170260)
摘    要:为优化H10亚型禽流感病毒快速检测方法,按照鸡偏嗜性密码子将A/Jiangxi/IPB13/2013(H10N8)的血凝素(HA)基因序列优化后人工合成,克隆至真核表达载体pCAGGs。将重组质粒双酶切后测序证明该质粒构建成功。用200μg的表达载体免疫6周龄SPF鸡,分别在第一次免疫后的第30天和第60天用相同剂量实施第二次和第三次免疫,末次免疫后的第10天心脏采血,分离血清,制备单因子血清。间接免疫荧光试验和western blot试验证明HA蛋白成功表达,单因子血清制备成功。血凝抑制试验结果表明抗体效价≥128,单因子血清特异性强,与其他亚型禽流感病毒无交叉反应。该研究为H10亚型流感病毒快速鉴定和研究奠定了基础。

关 键 词:禽流感病毒  H10亚型  单因子血清  DNA免疫
收稿时间:2020/1/3 0:00:00
修稿时间:2020/3/9 0:00:00
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