一种适用于辣椒大规模PCR鉴定的DNA快速提取技术 |
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引用本文: | 李委,戴祖云,杨中周,夏伟伟.一种适用于辣椒大规模PCR鉴定的DNA快速提取技术[J].中国农学通报,2018(4). |
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作者姓名: | 李委 戴祖云 杨中周 夏伟伟 |
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作者单位: | 合肥学院;安徽江淮园艺种业股份有限公司; |
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摘 要: | 传统辣椒DNA提取常采用CTAB法,该技术已难满足大量开展分子生物学工作的需要,为了解决此困境,进行了辣椒上碱煮法提取的尝试。将待测物置PCR管中,向管中加入80μL 0.2 mol/L Na OH溶液,置PCR仪上以100℃处理30 min,再以40μL Tris-HCl缓冲液将PCR管中溶液调至p H 7~8后,以之为模板可在后续的SSR-PCR中得到良好的实验结果。结果表明针对不同的研究目的需采取不同的组织部位来进行DNA的提取,当面临种子纯度测定的任务时,需要截取种子的芽根。当面临成熟植株的基因型筛选的任务时,需要截取植株的顶端嫩叶。综上,本研究表明相较其他传统的DNA提取方法,碱煮法确是更适合解决辣椒大规模鉴定问题的技术手段。
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