| Tgf2转座系统在转RFP基因斑马鱼上的应用 |
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| 引用本文： | 吴芳,叶星,邹曙明,张莉莉,孙成飞,田园园,白俊杰.Tgf2转座系统在转RFP基因斑马鱼上的应用[J].中国水产科学,2014,21(4):647-654. |
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| 作者姓名： | 吴芳 叶星 邹曙明 张莉莉 孙成飞 田园园 白俊杰 |
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| 作者单位： | 1. 中国水产科学研究院 珠江水产研究所; 农业部热带亚热带水产资源利用与养殖重点实验室, 广东 广州 510380; |
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| 基金项目： | 国家863计划项目(2011AA100404); 国家自然科学资金面上项目(31272688). |
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| 摘 要： | 提高目的基因的转植效率与可遗传效率是转基因鱼研制的关键点之一。本研究利用近年开发的金鱼转座子系统进行转基因斑马鱼的研制,探讨其在转基因鱼上应用的可行性。通过PCR方法,改造Tgf2转座子供体质粒pTgf2-EF1α-eGFP,将肌球蛋白轻链2启动子(mylz2)与红色荧光蛋白基因(RFP)定向插入其中,构建可在肌肉组织特异性表达红色荧光蛋白的Tgf2转座子供体质粒pTgf2-Mylz2-RFP。通过显微注射,将Tgf2转座子供体质粒与Tgf2转座酶mRNA共注射于斑马鱼(Danio ririo)受精卵中,共注射受精卵972粒,出膜后存活的仔鱼803尾,其中携带外源基因的仔鱼为615尾,阳性率为76.6%。转红色荧光蛋白基因斑马鱼首代F0培育至性成熟,将其中的10尾F0斑马鱼分别与野生型斑马鱼进行配对繁殖,其中1个组合产生了体表呈现均匀红色荧光的F1个体,因此RFP在F0的整合率为10%。将红色荧光F1个体培育至性成熟并与野生型鱼配对繁殖,F2的阳性个体占69%。本研究结果说明,由Tgf2转座子介导的转基因技术,可有效提高目的基因的转植效率与整合效率,在转基因鱼构建以及相关研究中具有开发应用前景。
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| 关 键 词： | Tgf2转座子 斑马鱼 转基因 红色荧光蛋白 整合率 |
| 修稿时间： | 2015/8/4 0:00:00 |
Application of the Tgf2 transposon system to RFP transgenic Danio rerio construction |
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| WU Fang,YE Xing,ZOU Shuming,ZHANG Lili,SUN Chengfei,TIAN Yuanyuan,BAI Junjie.Application of the Tgf2 transposon system to RFP transgenic Danio rerio construction[J].Journal of Fishery Sciences of China,2014,21(4):647-654. |
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| Authors: | WU Fang YE Xing ZOU Shuming ZHANG Lili SUN Chengfei TIAN Yuanyuan BAI Junjie |
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| Institution: | 1. Pearl River Fishery Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences of China, Key Laboratory of Tropic & Subtropic Fisheries Resource Utilization Aquaculture, Ministry of Agriculture, Guangzhou 510380, China; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Danio rerio transgenesis Tgf2 transposon red fluorescent protein (RFP) integration |
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