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版纳甜龙竹DNA提取方法及AFLP反应体系建立研究
引用本文:杨清,苏光荣,韩蕾,王正良,孙启祥,彭镇华.版纳甜龙竹DNA提取方法及AFLP反应体系建立研究[J].华北农学报,2010,25(Z1).
作者姓名:杨清  苏光荣  韩蕾  王正良  孙启祥  彭镇华
作者单位:1. 中国科学院,西双版纳热带植物园,云南,勐腊,666303;国际竹藤网络中心,中国林业科学研究院,研究生院,北京,100091
2. 云南省景洪市林业局,云南,景洪,666100
3. 中国林业科学研究院,林研所,北京,100091
4. 中国科学院,西双版纳热带植物园,云南,勐腊,666303
基金项目:中科院方向知识创新项目,国家科技部基础条件平台项目 
摘    要:用改进的CTAB法,在提取液中加入2%PVP(V/V)和2%β-巯基乙醇,提取到了高质量的基因组DNA,OD260/OD280在1.7~1.9之间,蛋白质、多酚类、色素、RNA等去除较彻底,适于AFLP分析。通过对版纳甜龙竹DNA提取、酶切连接、预扩增、选择性扩增等试验过程中各关键因素的比较研究,建立了优化的AFLP分子标记体系,得到了清晰的AFLP银染指纹图谱,试验结果重复性好。从64对MseI和PstI引物中筛选出8对扩增效果好的引物,利用筛选出8对引物对30份材料进行分析,共扩增出256条多态性带,获得32490个扩增位点,有13289个位点具有多态性,平均每对引物获得4061.25个扩增位点,其中具有多态性的位点为1661.125个,平均多态检出率为40.90%,8对引物组合对版纳甜龙竹30个个体的区分率达到100%。表明AFLP用于版纳甜龙竹种内不同材料间的遗传变异性分析是可行的。

关 键 词:版纳甜龙竹  DNA提取  影响因素

Study on Genomic DNA Extraction Method and AFLP Amplification Reaction System of D.hamiltonii Nees et Arn.ex Munro
YANG Qing,SU Guang-rong,HAN Lei,WANG Zheng-liang,SUN Qi-xiang,PENG Zhen-hua.Study on Genomic DNA Extraction Method and AFLP Amplification Reaction System of D.hamiltonii Nees et Arn.ex Munro[J].Acta Agriculturae Boreali-Sinica,2010,25(Z1).
Authors:YANG Qing  SU Guang-rong  HAN Lei  WANG Zheng-liang  SUN Qi-xiang  PENG Zhen-hua
Abstract:
Keywords:AFLP
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