H5N1亚型禽流感病毒核衣壳蛋白原核表达条件的优化 |
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作者姓名: | 邬成业 史平玲 张改平 郝慧芳 王爱萍 祁艳华 卜丹 |
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作者单位: | 1. 郑州大学生物工程系,河南,郑州,450001;河南省动物免疫学重点实验室,河南,郑州,450002 2. 郑州大学生物工程系,河南,郑州,450001 3. 河南省动物免疫学重点实验室,河南,郑州,450002 |
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摘 要: | 为了提高禽流感核衣壳蛋白(NP)在大肠杆菌中的表达量,试验研究了载体、培养基、温度、转速、诱导时间以及诱导剂IPTG浓度等不同条件对NP融合蛋白表达量的影响。结果:使用LB培养基于37℃培养3.5h后,采用终浓度为2mmol/L的IPTG在28℃、200r/min诱导培养5h,pET32a-NP融合蛋白表达量最大;SDS-PAGE检测结果表明pET32a-NP融合蛋白的分子质量与预计大小一致,约为70ku;Western-blot结果表明,pET32a-NP融合蛋白能与抗His标签的单克隆抗体发生特异性反应,说明NP蛋白得到正确表达。
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关 键 词: | 禽流感 核衣壳蛋白 原核表达 |
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