| H9亚型禽流感病毒血凝素单克隆抗体制备及鉴定 |
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| 作者姓名： | 邓显文 谢芝勋 谢志勤 刘加波 庞耀珊 谢丽基 范晴 罗思思 黄莉 |
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| 作者单位： | 广西兽医研究所/广西畜禽疫苗新技术重点实验室,南宁,530001 |
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| 基金项目： | 广西自然科学基金项目(2013GXNSFDA019015),广西科学研究与技术开发计划项目(桂科重14121003-3-3;桂科合14123001-8),广西水产畜牧兽医局科技项目(桂渔牧科1204930) |
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| 摘 要： | [目的]制备H9亚型禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)单克隆抗体,为检测诊断AIV提供技术支持.[方法]以灭活H9亚型AIV广西分离株为免疫原,免疫6~8周BALB/c雌性小鼠,然后取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,经血凝抑制试验(HI)及间接免疫荧光试验(IFA)筛选H9亚型AIV血凝素单克隆抗体的杂交瘤细胞.[结果]经过4次亚克隆,获得3株稳定的H9单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为8A4、1B11和7F1细胞株,其细胞株培养上清液HI效价为27~210,腹水HI效价为216~219;单克隆抗体亚类鉴定结果表明,3株H9单克隆抗体均属于IgG1亚类,其轻链均为K链.3株H9单克隆抗体只与H9亚型AIV发生特异性HI反应,而与其他HA亚型AIV及新城疫病毒(NDV)、减蛋综合症病毒(EDS)、传染性支气管炎病毒(IBV)无交叉反应.3株H9单克隆抗体细胞株的抗体分泌能力稳定性良好.[结论]用灭活H9亚型AIV为免疫原能成功制备针对H9亚型AIV血凝素的单克隆抗体,且具有良好的亚型广谱性和特异性.
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| 关 键 词： | 禽流感病毒(AIV) H9亚型 血凝素 单克隆抗体 HI效价 亚型广谱性 |
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