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表达禽流感病毒NP和M2融合基因重组乳酸菌的构建及鉴定
引用本文:李琼燕,杨桂连,张成赛,赵金辉,晋玉北,杨文涛,王春凤.表达禽流感病毒NP和M2融合基因重组乳酸菌的构建及鉴定[J].中国兽药杂志,2018,52(12):9-15.
作者姓名:李琼燕  杨桂连  张成赛  赵金辉  晋玉北  杨文涛  王春凤
作者单位:吉林农业大学动物科学技术学院,,,,,,吉林农业大学动物科学技术学院
基金项目:国家十三五重点研发计划项目(2017YFD0501000,2017YFD0500400);吉林省教育厅科学技术研究项目(JJKH20170318KJ)。
摘    要:为了在乳酸菌中表达H9N2亚型禽流感病毒(AIV)NP和M2基因并检测其反应原性,先以pMD19-T-M2质粒作为模板,采用PCR方法克隆M2全长基因,然后将M2基因亚克隆入pSIP409-pgsA′-NP质粒中,构建重组质粒pSIP409-pgsA′-NP-M2。并将重组质粒pSIP409-pgsA′-NP-M2通过电转化的方法转入植物乳杆菌Lb.plantarum NC8中,制备重组菌NC8-pSIP409-pgsA′-NP-M2。诱导表达NC8-pSIP409-pgsA′-NP-M2重组乳酸菌,并通过流式细胞术、免疫荧光和免疫印迹技术验证。结果表明,重组菌NC8-pSIP409-pgsA′-NP-M2能够经诱导表达NP-M2融合蛋白,并且与兔源NP单克隆抗体和抗M2的小鼠血清具有反应原性。这为后续研究禽流感广谱口服疫苗奠定基础。

关 键 词:禽流感病毒  NP基因  M2基因  原核表达  重组乳酸菌
收稿时间:2018/7/31 0:00:00
修稿时间:2018/11/5 0:00:00

Construction and Identification of recombinant Lactobacillus plantarum NC8 expressing NP fused with M2 proteins of avian influenza virus
Institution:College of Animal Science and Technology,Jilin Agricultural University,Jilin Provincial Engineering Research Center of Animal probiotics,Jilin,Changchun,130118,,,,,,
Abstract:
Keywords:
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