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原核表达dsRNA抗番木瓜畸形花叶病毒的研究
引用本文:张涛,沈文涛,言普,黎小瑛,周鹏. 原核表达dsRNA抗番木瓜畸形花叶病毒的研究[J]. 热带作物学报, 2014, 35(7): 1416-1423
作者姓名:张涛  沈文涛  言普  黎小瑛  周鹏
作者单位:1 海南大学农学院 2 中国热带农业科学院热带生物技术研究所;中国热带农业科学院热带生物技术研究所;中国热带农业科学院热带生物技术研究所;中国热带农业科学院热带生物技术研究所;1 海南大学农学院 2 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 3 中国热带农业科学院分析测试中心
基金项目:国家自然科学基金(No. 31171822);海南省重点科技计划(No. ZDXM20120027);海南省重大科技专项(No. ZDZX2013023-1-08)。
摘    要:番木瓜畸形花叶病毒(Papaya leaf distortion mosaic virus,PLDMV)是一种已对番木瓜种植业构成潜在威胁的新型病害,在转基因植物备受争议的背景下,利用原核表达的dsRNA来防控病毒的策略不失为一种新的选择。本文选取PLDMV CP基因全长(879 bp),运用OZ-LIC法构建了含有pdk内含子的ihpRNA结构,将其嵌入原核表达载体pSP73中,并转化RNaseⅢ缺陷型大肠杆菌M-Jm109LacY,构建了1种能高表达dsRNA的原核表达菌株M-Jm109LacY-CP879,以终浓度为0.4 mmol/L IPTG诱导后能够稳定高效的表达CP879-dsRNA。研究共设2个处理:保护性处理与治疗性处理。分别用含有CP879-dsRNA的粗提液对这2个处理的番木瓜植株进行喷施处理,通过统计发病率、观察病症变化以及ELISA分析结果表明,保护性处理能有效抑制番木瓜畸形花叶病毒的侵染,主要表现为发病时间推迟和相对较低的发病率;治疗性处理植株的病毒积累量会在喷施后第3~12天内出现暂时性的降低。结果表明,保护效果优于治疗效果,若每月喷施2~3次dsRNA粗提液,有望能够有效地预防PLDMV的侵染。

关 键 词:番木瓜畸形花叶病毒;原核表达;dsRNA;RNA沉默

dsRNA of Prokaryotic Expression for Resistance to Papaya Leaf Distortion Mosaic Virus
ZHANG Tao,SHEN Wentao,YAN Pu,LI Xiaoying and ZHOU Peng. dsRNA of Prokaryotic Expression for Resistance to Papaya Leaf Distortion Mosaic Virus[J]. Chinese Journal of Tropical Crops, 2014, 35(7): 1416-1423
Authors:ZHANG Tao  SHEN Wentao  YAN Pu  LI Xiaoying  ZHOU Peng
Affiliation:1 College of Agriculture, Hainan University 2 Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology, CATAS;Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology, CATAS;Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology, CATAS;Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology, CATAS;1 College of Agriculture, Hainan University 2 Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology, CATAS 3 Analysis & testing center, CATAS
Abstract:
Keywords:Papaya leaf distortion mosaic virus(PLDMV)   Prokaryotic expression system   dsRNA   RNA silencing
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