| 牛金属硫蛋白素bMTcin编码区的克隆及其在大肠杆菌中的表达研究 |
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| 引用本文： | 袁静,唐兴芳,刘变芳,李元瑞.牛金属硫蛋白素bMTcin编码区的克隆及其在大肠杆菌中的表达研究[J].西北农业学报,2002,11(4):28-31,87. |
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| 作者姓名： | 袁静 唐兴芳 刘变芳 李元瑞 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学食品科学与工程学院,陕西杨凌,712100 |
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| 摘 要： | 以本实验室由RT-PCR扩增得到的含有牛金属硫蛋白（bMT）cDNA的重组质粒pYJ101为模板，PCR扩增出牛金属硫蛋白素bMTcin的编码区，将其克隆到pGEM-T载体上并进行DNA序列测定。利用融合表达载体pGEX4T-1，在E.coli中诱导表达bMTcin，经过Glutathine Sepharose 4B亲和层析纯化后，SDS-PAGE检测GST:bMTcin的条带。结果表明，所克隆的bMTcin序列全长为141bp，其DNA序列与原模板中的序列完全相同，与GenBank中另外5个bMTcinDNA相比，第31位和86位与Conneely的序列为A和G，导致第11位（Thr）第29位（Arg）的氨基酸不同于其他4个序列（11位为Ala，29位为Lys）。融合表达蛋白GST:bMTcin的表达量大约为1.1mg/L发酵液。
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| 关 键 词： | 牛金属硫蛋白素bMTcin 编码区 克隆 大肠杆菌 表达 pGEM－T载体 DNA序列分析 pGEX4T－1 |
| 文章编号： | 1004-1389(2002)04-0028-04 |
| 收稿时间： | 2002/7/29 0:00:00 |
Cloning and Expression in E. Coli of the Coding Region for Bovine Metallothioneincin |
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| YUAN Jing,TANG Xing-fang,LIU Bian-fang and LI Yuan-rui.Cloning and Expression in E. Coli of the Coding Region for Bovine Metallothioneincin[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2002,11(4):28-31,87. |
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| Authors: | YUAN Jing TANG Xing-fang LIU Bian-fang and LI Yuan-rui |
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| Institution: | College of Food Science and Engineering, Northwest Sci-Tech University of Agriculture and Forestry, Yangling Shaanxi 712100, China;College of Food Science and Engineering, Northwest Sci-Tech University of Agriculture and Forestry, Yangling Shaanxi 712100, China;College of Food Science and Engineering, Northwest Sci-Tech University of Agriculture and Forestry, Yangling Shaanxi 712100, China;College of Food Science and Engineering, Northwest Sci-Tech University of Agriculture and Forestry, Yangling Shaanxi 712100, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | PCR pGEX4T-1 SDS-PAGE GST : bMTcin |
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